micrornas参与叶酸缺乏影响小鼠胚胎发育调控机制的初步研究

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1、博士研究生学位论文论文题目：microRNAs参与叶酸缺乏影响小鼠胚胎发育调控机制的初步研究姓名：梁燕学号：1011111387院（部）：首都儿科研究所教学医院专业：儿科学导师：吴建新研究员完成时间：二零一三年四月姓名：梁燕院系：首都儿科研究所学号：1011111387北京大学医学部学位论文原创性声明和使用授权说明原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品或成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明

2、。本声明的法律结果由本人承担。论文作者签名：日期：年月日学位论文使用授权说明（必须装订在提交学校图书馆的印刷本）本人完全了解北京大学医学部关于收集、保存、使用学位论文的规定，即：按照学校要求提交学位论文的印刷本和电子版本；学校有权保存学位论文的印刷本和电子版，并提供目录检索与阅览服务；学校可以采用影印、缩印、数字化或其它复制手段保存论文；在不以赢利为目的的前提下，学校可以公布论文的部分或全部内容；学校可以为存在馆际合作关系的兄弟高校用户提供文献传递服务和交换服务。请选择图书馆发布时间:□即时发布□一年发布□二年发布（保密论文在解密后遵守以上规

3、定）论文作者签名：导师签名：日期：年月日论文题目microRNAs参与叶酸缺乏影响小鼠胚胎发育调控机制的初步研究PreliminaryMechanismResearchofmicroRNAsInvolvedinRegulatingtheEffectsofFolateDeficiencyinMouseEmbryonicDevelopment研究生：梁燕学号：1011111387院(部)：首都儿科研究所教学医院专业：儿科学导师:吴建新研究员完成时间：二零一三年四月目录中文摘要„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„1英文摘要„„„„„„„„

4、„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„4前言„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„7技术路线„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„11第一部分叶酸缺乏对小鼠胚胎干细胞增殖和凋亡的影响„„„„„„„121.实验材料与方法„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„122.结果„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„323.小结„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„36第二部分miRNAs参与调控叶酸缺乏引起的小鼠胚胎干细胞周期特异性凋亡过程„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„

5、381.实验材料与方法„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„382.结果„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„443.小结„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„60第三部分miR-302a功能学初步研究„„„„„„„„„„„„„„„„611.实验材料与方法„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„612.结果„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„673.小结„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„72讨论„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„73结论„„„„„„„„„„„„

6、„„„„„„„„„„„„„„„„„„83参考文献„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„84文献综述„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„90缩略词表„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„97致谢„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„98个人简历„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„99microRNAs参与叶酸缺乏影响小鼠胚胎发育调控机制的初步研究博士研究生梁燕导师吴建新研究员首都儿科研究所教学医院儿科学中文摘要胚胎发育是一个复杂的过程，受到遗传与环境的交互调

7、控。叶酸作为一种水溶性维生素，参与一碳单位的循环代谢、DNA的合成与甲基化，因此在胚胎发育过程中发挥着重要作用。之前研究表明叶酸缺乏可抑制正常的胚胎发育，如引起神经管畸形，此外还可在个体成年后引起肿瘤发生。microRNAs(miRNAs)是一类长约17-24个核苷酸的内源性单链非编码RNA，通过与靶mRNA完全或不完全互补配对，导致靶mRNA降解或抑制其翻译，参与基因转录后调控。目前miRNAs已被证实参与调控细胞增殖、分化、凋亡、细胞周期进展等生理过程。然而，叶酸缺乏如何影响胚胎发育过程及其具体调控机制仍不明确，miRNAs是否参与调控此过程仍需证

8、实。目的1.以小鼠胚胎干细胞为模型，以细胞增殖和凋亡为切入点，探究叶酸缺乏对胚胎发育的影响以及