ibv分离株gx-yl5感染对鸡气管黏膜和哈德氏腺免疫功能影响的研究

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1、分类号UDC$858．31硕士学位论文密级IBV分离株GX．YL5感染对鸡气管黏膜和哈德氏腺免疫功能影响的研究郑衍生论文答辩日期2Q!三生5旦3Q旦学位授予日期答辩委员会主席奎鏖然教援广西大学学位论文原创性和使用授权声明删IlllllllllllllllllllllJIlllllllllJlllllllllY2408139本人声明所呈交的论文，是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成果。除已特别加以标注和致谢的地方外，论文不包含任何其他个人或集体己经发表或撰写的研究成果，也不包含本人或他人为获得广西大学或其它单位的学

2、位而使用过的材料。与我一同工作的同事对本论文的研究工作所做的贡献均已在论文中作了明确说明。本人在导师指导下所完成的学位论文及相关的职务作品，知识产权归属广西大学。本人授权广西大学拥有学位论文的部分使用权，即：学校有权保存并向国家有关部门或机构送交学位论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅，可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索和传播，可以采用影印、缩印或其它复制手段保存、汇编学位论文。本学位论文属于：口保密，在年解密后适用授权。哜保密。(请在以上相应方框内打“、／”)论文作者签名：铀鬯抟指导教师签名：{参

3、建芗作者联系电话：7午77岁77，7。夕日期：H冲州加日期：劫增．／沥电子邮褓zz沙s吻纱俐·一IBV分离株GX．YL5感染对鸡气管黏膜和哈德氏腺免疫应答影响的研究IBV分离株GX．YL5感染对鸡气管黏膜和哈德氏腺免疫应答影响的研究摘要鸡传染性支气管炎(Infectiousbronchitis，IB)是由冠状病毒鸡传染性支气管炎病毒(Infectiousbronchitisvirus，mv)弓l起的一种急性高度接触传染性呼吸道疾病，给养禽业带来严重的经济损失。IBV是典型的嗜黏膜病原，主要通过呼吸道黏膜途径感染机体。黏膜免

4、疫可诱导局部黏膜免疫和诱导全身免疫，在抗IBV感染免疫应答中发挥非常重要的作用。禽类的气管黏膜和哈德氏腺是黏膜免疫系统的重要组成部分，因此研究IBV感染对气管黏膜和哈德氏腺免疫功能的影响非常重要。本研究采用IBV广西分离株GX．YL5人工感染免疫鸡和非免疫鸡，应用实时荧光定量RT-PCR方法检测不同时相气管黏膜和哈德氏腺中与天然免疫相关的部分模式识别受体(TLR2、TLR3、TLR6和TLR7)和细胞因子(IFN．0【、IFN．B、Mx、IL．6、IL．10、IL．1p、MMP3、MIP．1p、CXCR4和CCR6)的mR

5、NA转录水平与IBV病毒载量动态，同时使用ELISA检测气管黏膜和哈德氏腺分泌型免疫球蛋白A(sIgA)和血清IgG抗体，旨在从分子水平探究IBV对鸡气管黏膜和哈德氏腺免疫功能的影响，为阐明IBV的分子致病机制奠定基础。实验结果显示：在感染早期(14DPI前)，攻毒组和免疫攻毒组气管黏膜和哈德氏腺TLR2、TLR3、TLR6和TLR7的mRNA表达水平在大部分时间点都出现了不同程度的上调，气管黏膜TLR2、TLR3、TLR6和TLR7整体上比同组哈德氏腺上调表达明显。攻毒14天后，攻毒组和免疫攻毒组哈德氏腺与气管黏膜所检测

6、TLRs表达水平已逐渐下调或恢复正常水平。揭示气管黏膜和哈德氏腺TLR2、TLR3、TLR6和TLR7参与了IBV感染早期的免疫应答，表明了IBV感染对宿主的天然免疫应答具有明显影响。在感染早期(14DPI前)，攻毒组气管黏膜IFN．13、IL．6、IL．10、IL．1B、CXCR4、CCR6和MMP3比同组哈德氏腺相同基因表达上调更明显；免疫攻毒组气管黏膜IFN．0【、IFN．p、Mx、IL．6、IL．10、IL．1p和CCR6比同组哈德氏腺相同基因上调表达明显；攻毒组气管黏膜Mx(8DPI前)、IFN-]3(3DPI)

7、和IL．10(5DPI)LL免疫攻毒组气管IBV分离株GX-YL5感染对鸡气管黏膜和哈徒，氏腺免癌泣答影响的研究黏膜相同基因上调更显著；攻毒组哈德氏腺Mx(1DPI)、IFN．p(8DPI)、IL-10(5DPI)和CCR6(1DPI)与免疫攻毒组哈德氏腺相同基因表达差异明显。攻毒14天后，上述细胞因子在攻毒组和免疫攻毒组哈德氏腺与气管黏膜表达水平已逐渐下调或恢复正常水平，表明了IBV感染早期多种细胞因子参与了抗IBV感染免疫应答，但对IBV感染的免疫应答程度因细胞类型及宿主免疫状态差异而不同。攻毒组和免疫攻毒组气管黏膜病

8、毒载量分别在攻毒后3天和攻毒后5天达到峰值，攻毒组和免疫攻毒组哈德氏腺病毒载量均在攻毒后3天达到峰值，攻毒组和免疫攻毒组气管黏膜和哈德氏腺在攻毒后1天至8天都保持较高的病毒载量，随后随时间的推移病毒含量逐渐减少。整体上攻毒组气管黏膜和哈德氏腺比免疫攻毒组相同组织的病毒载量高，攻毒组和免疫攻毒组哈德氏腺病