人aif+c末端截短体分子基因克隆表达及对hela细胞促凋亡活性的研究

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1、第四军医大学硕士学位论文人AIFC末端截短体分子的基因克隆表达及对HeLa细胞促凋亡活性的研究姓名：张巍申请学位级别：硕士专业：免疫指导教师：杨安钢20070501第四军医大学硕士位文学论缩略语表缩略语英文全称中文全称AFPα-fetoprotein甲胎蛋白AIFapoptosisinducingfactor凋亡诱导因子Apaf-1apoptoticproteaseactivatingfactor-1凋亡蛋白酶激活因子-1Acinusapoptoticchromatincondensation核凋亡染色质固缩诱导分子inducerinthenucleusBHBcl-2h

2、omologydomainBcl-2同源结构域CADcaspase-activateddeoxyribonucleasecaspase活化的脱氧核糖核酸酶caspasecysteinylaspartate-specificprotease天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶CDcytosinedeaminase胞嘧啶脱氨酶CEAcarcinoembryonicantigen癌胚抗原CTLcytotoxinTlymphocyte细胞毒性T淋巴细胞Cytccytochromec细胞色素cDFF45DNAfragmentationfactor-45DNA片段化因子-45DNA-PKD

3、NA-dependentproteinkinaseDNA依赖的蛋白激酶DTdiphtheriatoxin白喉毒素EF-2elongationfactor-2(蛋白质合成)延伸因子ELISAenzyme-linkedimmunosorbantassay酶联免疫吸附测定法EndoGendonucleaseG核酸内切酶GFADflavinadeninedinucleotide黄素腺嘌呤二核苷酸GCVgancyclovir环氧鸟苷GFPgreenfluorescenceprotein绿色荧光蛋白GM-CSFgranulocyteandmacrophagecolony粒细胞巨噬细

4、胞集落刺激因stimulatingfactor子GRglutathionereductase谷胱甘肽还原酶GrBgranzymeB颗粒酶BHSV-tkherpessimplexvirusthymidinekinase单纯疱疹病毒胸苷激酶1第四军医大学硕士位文学论独创性声明秉承学校严谨的学风与优良的科学道德，本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，不包含本人或他人已申请学位或其他用途使用过的成果。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作

5、了明确的说明并表示了致谢。申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担一切相关责任。论文作者签名：日期：保护知识产权声明本人完全了解第四军医大学有关保护知识产权的规定，即：研究生在校攻读学位期间论文工作的知识产权单位属第四军医大学。本人保证毕业离校后，发表论文或使用论文工作成果时署名单位仍然为第四军医大学。学校可以公布论文的全部或部分内容（含电子版，保密内容除外），可以采用影印，缩印或其他复制手段保存论文。学校有权允许论文被查阅和借阅，并在校园网上提供论文内容的浏览和下载服务。论文作者签名：导师签名：日期：第四军医大学硕士位文学论人AIFC末端截短体分子的基因克隆、表达及对

6、HeLa细胞促凋亡活性的研究硕士研究生：张巍导师：杨安钢教授辅导老师：张勇博士第四军医大学免疫学教研室，西安710032摘要细胞凋亡（apoptosis）是细胞受到生理或病理刺激后发生的自发性死亡过程。AIF（ApoptosisInducingFactor，凋亡诱导因子）是1996年发现的一种凋亡效应分子。正常情况下，AIF蛋白定位于细胞线粒体膜间隙，当有凋亡信号刺激时，AIF分子从线粒体释放到细胞浆，再通过其核定位信号转位到细胞核中，直接引起染色体凝集和DNA的大片段（~50kb）断裂，导致细胞凋亡。AIF的促凋亡活性不受Bcl-2过表达的影响，也不依赖于caspas

7、es的活性，在低等真核细胞凋亡、以及哺乳类胚胎发育过程中AIF也具有不可或缺的作用。与caspases等其他凋亡效应分子相比，AIF可直接诱导细胞凋亡发生而不受胞浆中其他凋亡抑制因子的抑制，AIF的这一优势对于它诱导肿瘤细胞凋亡，具有特殊意义。Susin等研究发现，人AIF前体蛋白为67kD，包括以下几个结构域：从氨基端起，（1）氨基端100aa长度的线粒体定位信号（MLS）；（2）27aa的Spacer序列；（3）核定位信号（NLS）；（4）羧基端485aa的氧化还原酶功能域（129-613位氨基酸）。AIF前体分子在线粒体被切割后，形