重组华溪蟹金属硫蛋白在sumo融合系统中的表达与纯化及金属螯合能力的研究

重组华溪蟹金属硫蛋白在sumo融合系统中的表达与纯化及金属螯合能力的研究

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1、万方数据山西大学2012届硕士研究生学位论文重组华溪蟹金属硫蛋白在SUMO融合系统中的表达与纯化及金属螯合能力的研究姓名:武阳导师:王兰教授专业:水生生物学研究方向:动物生物化学培养单位:生命科学学院学习年限:2009年9月一2012年6月本项目得到国家自然科学基金(No.30970361,30640051)和山西省自然科学基金(No.20080“069)项目的资助。二。一二年六月万方数据ThesisforMaster’sDegreeofShanxiUniversi哆in2012EXpreSSl

2、onandDUrltlCatlonn●1●一J●ofmetallothioneinfIrom·跏印D砌觊D以intheSUMofusionsystem,andStudies0nitsmetalchelatingabilitVancIStUcIleS0nltSmetalChelatingabiIitVPostgraduateWu1Y-angSuperVisorProf.WangLanMajorSpecial毋HydrobiologyAnimaIBiochemistryDepartmentSchoo

3、lofLifeScienceResearchDurationSept,2008-June,2012ThisdissertationwassupportedbygrantsfrOmtheNationalNaturalScienceFoundationofChina((No.30970361,30640051))andShanxiNaturalScienceFoundation(No.2008011069).June.2012万方数据目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯..IAbSlTact⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..i第一章综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯ll金属硫蛋白的特性及研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一11.1MT的理化性质及结构特点⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯21.2MT的生理功能⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯21.3MT的分类⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯31.4MT的分

5、离纯化研究现状及进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯41.5MT的突变体研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯41.6MT的应用前景⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯52MT原核表达系统的研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯62.1原核表达系统简介⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.62.2MT的原核表达研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯72.3suM0融合表达系统简介⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

6、⋯..73本论文的研究内容和目的意义⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯8第二章重组华溪蟹金属硫蛋白原核表达载体的构建⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..91材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯91.1材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.91.1.1实验材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯91.1.2主要实验试剂⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯91.1.3实验仪器⋯⋯⋯⋯⋯⋯

7、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.101.2实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.1l1.2.1原核表达载体pET28a—MT和pET28a—SUOM-MT的构建⋯⋯⋯⋯⋯111.2.1.1PCR加酶切位点⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.121.2.1.2PCR产物的检测及胶回收目的片段⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.131.2.1.3目的片段的克隆⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.131.2.1.4目的片段与表达载体pET28a-SUMO、pET28a的双

8、酶切⋯⋯..131.2.1.5目的片段与表达载体的连接⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..141.2.1.6连接产物的转化⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一14万方数据1.2.1.7质粒的提取⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯151.2.1.8重组表达载体的筛选和PCR鉴定及测序⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.151.2.1.9菌种的保存⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯151.2.2原核表达载体pGEx一6p一1一MT的构建⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯152实验结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

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