tlr4与相关炎性因子在高脂饮食诱导肥胖大鼠中的表达

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1、中图分类号密级TLR4与相关炎性因子在高脂饮食诱导肥胖大鼠中的表达ExpressionofToll—LikeReceptor4andRelativeInflammatoryFactorsinObeseRatsFedbyHigh—FatDiet计：学位论文：39页表插格：6个图：8幅指导教师：刘正娟教授申请学位级别：硕士学位陈禹含学科(专业)：儿科学培养单位：大连医科大学附属第二医院完成时间：二。一三年五月答辩委员会主席：独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论

2、文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得大连医科大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作砉签名：!叁禹金签字日期：坐年上月上日关于学位论文使用授权的说明本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权大连医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本学位论文属于(请在以

3、下相应方框内打“4”)：1．保密口，在一年解密后适用本授权书。2．不保密吼作者签名：一『专、焉舍日期：．2。l≥年，月，日导师签名：“2谚巧醐砌B年朋7日目录一、摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1(一)中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1(二)英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3二、正文⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5(一)前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5一(一)日IJ舌⋯⋯⋯”⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯‘(二)材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯61．主要试剂及药品⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯62．仪器设备⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯73．动物模型的制备⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯74．酶联免疫吸附测定法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯94．1准备试剂⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯94．2检测程序⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯94．3结果计算与判定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯105．免疫组化染色检测下丘脑及肝脏组织中TLR4的表达⋯⋯105．1常规石蜡包埋⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯105．2组织切片⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

5、105．3免疫组织化学染色法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯106．RealTimePCR方法测定下丘脑及肝脏组织中TLR4mRNA的表达量⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯126．1总RNA的提取⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯126．2RealTimePCR法检测目的基因相对表达量⋯⋯⋯⋯137．统计学方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯14(三)结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯151．大鼠生长状况及两组大鼠饲料摄入量和热量情况⋯⋯152．大鼠血清中炎症因子TNF．Q、IL．6的水平⋯⋯⋯⋯⋯173．免疫组化染色显示TLR4组织中蛋白的表

6、达⋯⋯⋯⋯⋯184．下丘脑及肝脏组织中TLR4mRNA表达水平⋯⋯⋯⋯⋯18(四)讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯19(五)结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯24(六)参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯25三、综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯28(一)综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯28(二)参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯34四、附录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯DIDOIDDLD⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯36五、攻读学位期间发表文章情况⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

7、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯38六、致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯39大连医科大学硕士学位论文TLR4与相关炎性因子在高脂饮食诱导肥胖大鼠中的表达硕士生姓名：指导教师：专业名称：陈禹含支4正娟教授儿科学摘要目的：探讨在高脂饮食诱导下Toll样受体4(Toll—likereceptor4，TLR4)在肥胖大鼠下丘脑及肝脏组织中的表达，以及血清中相关炎性因子如肿瘤坏死因子(TNF．0【)、白介素．6(IL．6)的改变。方法：选择清洁级雄性4周龄SD大鼠30只，体重约809，购白大连医科大学动物部。将实验动物按随机排列法分为两组：高脂饮食组(20

8、只)和正常饮食对照组(10只)，共喂养8周。建立高脂饮食诱导的肥胖(DIO)大鼠模型，应用免疫组化染色方法对