aecopd患者病情严重程度与tnf-a、il-10、rantes水平的相关性研究

aecopd患者病情严重程度与tnf-a、il-10、rantes水平的相关性研究

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1、目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.1英文摘要⋯⋯..⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..5研究论文AECOPD患者病情严重程度与TNF—a、IL.10、RANTES水平的相关性研究前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯9刚舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯10结果⋯⋯⋯.⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..14附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯16附表

2、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯20讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯24结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯29参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一.30综述单核细胞及其来源的细胞与慢性阻塞性肺疾病⋯⋯⋯⋯⋯35致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯48个人简历⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯49中文摘要AECOPD患者病情严重程度与TNF.a、IL.10、RANTES水平的相关性研究摘要目的:

3、慢性阻塞性肺疾病(Chronicobstructivepulmonarydisease,COPD)是一种常见而又严重危害人类健康的呼吸系统疾病,以气流受限呈进行性发展且不完全可逆为特征,是全球范围内发病率和死亡率增加的主要原因之一,造成了严重的经济和社会负担,这种情况日益加重【l】。目前临床上尚缺乏能够适时、准确评估AECOPD(acuteexacerbationofCOPD)的发生、发展及预后的指标,研究能够判断AECOPD发生、发展及预后的敏感指标具有重要意义。感染是COPD发生发展的重要因

4、素。脂多糖(1ipopolysaccharide,LPS)可以通过刺激机体各种免疫细胞产生大量的细胞炎症介质,引起机体的一系列炎症反应。P38丝裂原活化蛋白激酶(mitogen.activatedproteinkinase,MAPK)是参与细胞内信号传导的重要激酶,介导炎症反应,在LPS导致的炎症瀑布反应中发挥重要作用【2】。p38MAPK抑制剂SB203580可抑fl;tJLPS所致肺部的炎症反应。本实验以健康人和AECOPD病人血清及外周血单个核细胞(peripheralbloodmonon

5、uclearcell,PBMC)为研究对象,观察健康对照组及不同程度AECOPD患者血清中TNF.a、IL.10、RANTES的水平及SB203580对LPS诱导的PBMCs分泌TNF.a、IL.10、RANTES水平的影响。探讨AECOPD病情严重程度与细胞因子TNF.a、IL.10、RANTES的相关性,为临床预防、治疗AECOPD提供新的思路。方法:1研究对象:选择2012年3月一2013年1月我院呼吸内一科住院的AECOPD患者及同期门诊体检证实的健康志愿者。按2011年中华医学会呼吸分

6、会制定的COPD及急性加重期的诊断标准分为:(1)AECOPD组;(2)健康对照组。根据FEVl/FVC、FEVI%预计值和临床表现将AECOPD组进一步分为II级(中度组)(50%≤FEVl%<80%),ⅡI级(重度组)(50%

7、对照组及实验组(AECOPD患者)于清晨空腹采肘静脉血8ml,其中3ml注入干燥的真空非抗凝管中,以4。C3000r/min离心15min,吸取上清液至于EP管,于.80。C冰箱内保存,待测TNF.a、Ⅲ.10、RAN匝S的水平。另5ml血注入EDTA抗凝管中,用于PBMCs的分离。2.2分离单个核细胞:用淋巴细胞分离液分离出每份血液中的单个核细胞。O.4%台盼蓝染色,排除无活性的细胞,活性细胞数>95%可采用。用含10%dx牛血清的RPMI1640培养液调整细胞浓度均为l×106/ml,备用。

8、2.3ELISA法测定血清中TNF.a、IL.10、RANTES浓度。2.4ELISA法测定PBMCs细胞上清中TNF.a、IL.10、RANTES的含量变化。3实验分组:首先将分别将各组分离的PBMCs计数后用含10%dx牛血清的RPMI1640培养液调整细胞浓度到1×10‰,于24孔板中孵育(37℃C02孵箱中),实验共分5组。3.1对照组:加入与实验组等体积无血清RPMll640培养液:3.2LPS组:终浓度1ug/mlLPS,刺激90mini3.3LPS+SB5组:加入终浓度5脚SB20

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