rna干扰沉默pdgfr-β基因对大鼠c6胶质瘤细胞增殖及放射敏感性的影响

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1、中图分类号B23坌：垒!UDC610学校代码密级硕士学位论文10533RNA干扰沉默PDGFR_p基因对大鼠C6胶质瘤细胞增殖及放射敏感性的影响Effectofsilencingplatelet—derivedgro、批f．actorreceptor．BbvRNAinterferenceonproliferationandradiosensitivityinratC6gliomascells作者姓名：学科专业：研究方向：学院(系、所)：论文答辩日期彭瑜平临床医学肿瘤学湘雅医院矽h∑i彳答辩委员会主席中南大学二O一三年五月原创性声明本人

2、声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中南大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。作者签名：到垴聋日期：卫年』月兰日学位论文版权使用授权书本人了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学位论文并根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论文的全部或部分内容，可以采用复印、缩

3、印或其它手段保存学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。作者签名：型舔导师签名牡日期：巫年』月兰日硕士毕业论文中文摘要I矾A干扰沉默PDGFR-p基因对大鼠C6胶质瘤细胞增殖及放射敏感性的影响摘要目的：探索I斟A干扰抑制PDGFR-p的表达对大鼠C6胶质瘤细胞增殖的影响，及是否有放疗增敏作用。方法：构建PDGFR-p．smⅢA慢病毒干扰载体，转染至大鼠C6胶质瘤细胞中，将细胞分为NC(NegativeControl，NC)组、KD(KnockDown，KD

4、)组。用westem_blot检测干扰后C6细胞中PDGFR—p的蛋白表达抑制水平。用MTT法比较两组细胞的生长曲线。用克隆形成实验检测两组联合放疗后细胞的存活率及放射敏感性。流式细胞仪检测两组联合放疗后细胞的周期分布。结果：慢病毒载体转染C6细胞后，荧光显微镜下观察荧光率大于80％，表明转染成功。Westem-blot检测KD组细胞中PDGFR-p的蛋白表达水平明显下降，且与NC组比较有显著性差异(P值

5、合放疗后比NC组联合放疗后细胞的平均致死剂量Do由1．843Gy降为1．297Gv，放射增敏比SER为1．421，提示有放疗增敏作用。流式细胞仪测得KD组联合放疗后细胞周期阻滞在G2／M期。结论：沉默PDGFR—p的表达后，不能够抑制大鼠C6胶质瘤细胞的生长缓，但在体外具有放疗增敏作用，有关其放疗敏感性机制及体内实验有待进一步研究，PDGFR-p可作为胶质母细胞瘤治疗的靶点之一。关键词：RNA干扰；血小板源生长因子受体．p；胶质母细胞瘤；细胞增殖；放射增敏性分类号：R739．41Ef．fectofsilencingplatelet—d

6、erivedgrowthfactorreceptor-pbyRNAinterferenceonproliferationandradiosensitiVityinratC6gliomascelIsABSTRACTObiective：ExploretheefI’ectofinhibittingtheexpressionofPDGFIoDbyRNAinterferenceonpr01if．erationandradiosensitivi田inratC6gliomacells．Methods：BuildthePDGFR．D．shRNA-Le

7、ntiviralRNAiVectorandthentransfectedintoratC6gliomacells．ThecellswerediVidedintotheNC(NegativeControl，NC)groupandKD(KnockDown，KD)group．Westem．blotdetectiontestthesuppressionlevelofPDGFR—pDroteinexDressioninC6ceUs．ThegrowthcurveofthetwogroupswereDrOtelnexpresslOnlnoOceUs

8、．1nel≯O、^兀nCurVeOI【ne【wogroupsweI。ecomparedwithMTTassay．C10nogenicassaytestthecellsurviValrateandtheradiosensi