拉伸应变对小鼠mlo-y4细胞增殖的影响及作用机制研究

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2、写的研究成果，指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写，文责自负。研究生虢锄埤导师麟／年}Rf毛Et目录㈣㈣㈣㈣㈣㈣吣Y2397954中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4研究论文拉伸应变对小鼠ML0．Y4细胞增殖的影响及作用机制研究引言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯99弓；吞⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯第一部分拉伸对小鼠ML0．Y4细胞增殖及池0．Y4细胞钙信号通路的影响前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1

3、1月U吾⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯l材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯13结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯11／二：日；1≮⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯l附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯19附表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯22讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯23小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯26参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯27第二部分拉伸应变对小

4、鼠池0．Y4细胞CaMKII／CREB信号通路的影响前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯32一日U吾⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯j材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯o⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯34结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯37多口木⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯J，附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯38附表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯41讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯43小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

5、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯46参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯47结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯51综述应力作用下骨细胞信号转导及调控作用研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯52致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯60个人简历⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯61中文摘要拉伸应变对小鼠MLO．Y4细胞增殖的影响及作用机制研究摘要目的：骨细胞作为骨组织中机械应力的直接感受器，对维持骨组织的正常功能非常重要。但是应力作用下骨细胞的分子生物学机制还不是十分清楚。本文拟研究不同周期和不同时间的拉伸

6、应变对小鼠MLO．Y4细胞Ca2+及其信号通路的影响，进而探讨拉伸应力对骨细胞的部分作用机制。为进一步研究骨重建机制提供科学理论和实验依据。方法：1、研究选用小鼠骨细胞系MLO．Y4细胞作为研究对象，采用四点弯曲拉伸装置对小鼠骨细胞分别施加应力为：2500雌、50009e，频率为O．5Hz，时间：1次／d、lh／次、连续拉伸3d。同时设有加入钙离子抑制剂维拉帕米组(Verapamil)及U73122组，另设Oge做为对照组。实验分为：O肛s(controlgroup-，2500pe、50009e，V+2500灶e、V+50009a，U73122+2500卜te、U

7、73122+5000肛e七组。采用MTT实验检测细胞增殖活性，探讨拉伸应变对MLO．Y4细胞增殖活性的影响。2、研究选用小鼠骨细胞系MLO—Y4细胞作为研究对象，采用四点弯曲拉伸装置对小鼠骨细胞分别施加频率为O．5Hz，应力分别为：2500“e、50009e，不同时I'N(1min、3min、5rain、10min)的拉伸应变，另设0Lts(controlgroup)做为对照组，采用荧光分光光度法检测各组细胞的荧光强度值，探讨基底拉伸应变对细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)的影响。3、给MLO．Y4细胞施加频率O．5Hz，应力分别为：2500}te、50009

8、e，实验分