菜菔硫烷抑制人腺样囊性癌裸鼠移植瘤的体内实验研究

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2、发表或撰写的研究成果，指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写，文责自负。研究生答辄叫t陟导师签；：勰扣2,ol1【年V月≥’日目录JIlJfllJJlflllllrlIJJllllJllIJIfJPllfIJPlalllll』Y2582040中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯60Brim⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4研究论文莱菔硫烷抑制人腺样囊性癌裸鼠移植瘤的体内实验研究前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯8月IJ吾⋯“⋯一⋯⋯⋯“⋯“一

3、“””⋯一⋯⋯⋯“⋯⋯⋯“⋯⋯⋯⋯一一’8材料方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯9结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·⋯⋯·⋯·⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯15附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯17附表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯22讨{仑⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·⋯·⋯··⋯··⋯⋯⋯·⋯·⋯⋯····⋯⋯⋯······23结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯27参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯28综述头颈癌裸鼠移植瘤模型的研究

4、进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯31致谢⋯··⋯⋯⋯·················⋯················⋯⋯···⋯····⋯··⋯⋯·······44个人简历⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯46中文摘要莱菔硫烷抑制人腺样囊性癌裸鼠移植瘤的体内实验研究摘要目的：涎腺腺样囊性癌(salivaryadenoidcysticcarcinoma，SACC)，是一种口腔颌面外科最常见的恶性涎腺上皮来源性肿瘤。它有嗜神经血管性生长特点，有着较强的局部侵袭性，因而容易发生血行性远处转移等生物学特性；

5、同时该病恶性程度高，对于放射治疗的敏感性却较低。正因为．如此，该肿瘤手术切除后具有较高的局部复发率和远处转移率，其远端转移率居口腔颌面部首位。然而，涎腺腺样囊性癌的发病及其转移机制目前仍不十分清楚。因而探索新的治疗方法，来提高对腺样囊性癌的治疗效果，减少局部复发和远处转移的几率，改善患者的生存质量就更显得尤为重要。莱菔硫烷(sulforaphane，SFN)是一种天然存在于十字花科蔬菜中属于异硫氰酸盐(isothiocyanates，ITCS)类的物质。该类物质具有强抗癌作用，近些年来相继有研究报道莱菔硫烷具有抗肿

6、瘤作用，我们前期的体外实验表明，莱菔硫烷能够抑制腺样囊性癌细胞系ACC．M的增殖，触发由Caspase介导的凋亡，并且Bcl。2家族成员在凋亡中起重要作用。但是在体内环境中，莱菔硫烷能否抑制腺样囊性癌的生长，国内外未见报道。本次实验中，我们采用了人肺高转移性涎腺腺样囊性癌细胞系ACC．M进行裸鼠的皮下接种，建立了裸鼠移植瘤模型，通过口服给予适宜剂量的莱菔硫烷后，观察莱菔硫烷对人涎腺腺样囊性癌体内移植瘤模型是否具有抑制增殖和诱导其凋亡的作用，探讨其可能的分子作用机制，旨在为腺样囊性癌的多模式治疗中拓展新的植物化学药物

7、治疗途径提供相关的实验资料。方法：1材料1．1人涎腺腺样囊性癌细胞株ACC．M：由中国上海交通大学口腔颌面外科实验室提供，该细胞系建立于1995年。1．2莱菔硫烷(SFN)：美国匹兹堡大学医学中心头颈外科提供，购自LKT实验室，纯度≥99％。1．3裸鼠：北京军事医学科学院动物实验中心提供，lO只雄性裸鼠，中文摘要中又捅要4～6周龄，体重16---20克。1．4原位细胞凋亡检测试剂盒：购自美国ROCHE公司1．5DAB检测试剂盒：购于河北博海生物工程有限公司2实验方法2．1药液配制：莱菔硫烷用磷酸盐缓释液PBS稀释成

8、100mmol／L浓度的储存液，冰冻于．20℃冰箱中。2．2细胞培养：将冻存的ACC．M细胞系予以复苏，培养液均采用RPMll640加入10％的胎牛血清和青霉素(100U／mL)、链霉素(100lag／mL)按比例配制，将复苏后的细胞置于37。C、5％C02恒温恒湿箱内培养，隔天换液，约72～96h后可以传代。2．3细胞接种及动物模型的建立：细胞长至对数生长