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1、沙眼衣原体感染实验室诊断研究中国人兽共患病杂志Ch-■1neseJ—ouaz—o文章编号：1002—2694(2001)01—48—02沙眼衣原体感染实验室诊断研究阎玲周劲松•李丹冯树异王双元摘要:目的摄讨几种检寝j泌屎牛殖道沙眼表原体惑盎方击的临康诊断价值.方法周细胞培养法，稽厚试验,PGR扫连骐窗试验舟别对81例STD门涉女性患者宫颈分泌物毋本进行平行桂剥.结果以细胞培养作参出，糖濾试驻的皱感性为875%.特异性为98.6%;pCR敏感性为100%,特异性为98.6%;透明窗试验敏堪性为75.0%,特异性100%结论四种检测方法均可应用于沙眼袁原体感染的涉断，且糖原试验是一
2、种快速，易，厅，经济的方法.关键词:沙眼农原体;瓣原试验;聚合醇链反应;细胞培养;连明窗试验STUDlESONLABORATORYDIAGNOSiSOFCHLAMyDJA了RACH0MATIJSINFECT1ONYANLing,ZHOUJin-ng,I_IDan,FENGShuyi,WANGShuangyuan(DepartmentofPathogenicBiology,PekingUniversityHealthScienceCenter9BeOinglOOO83ABSTRACt:ATostudyonserere/methods/ordiagnosticvedueofcMam
3、ydiainfectionofurogenita/tractMe/hodsWeex一amined81specimensfromfem山outpatientbyusingglycogenassay.PCRe[earviewandcellcultureResultsComparedwithceilculturethesensitivityandspecificityreasf~Uows:gLycogenaz,say,875%-98<6%;PCR,100%,986%;clearview.75O%,100%.Cond〜sionsStudied/oinrnethods.allCallbe
4、usedtOdiagnosisofCfdamy〜iatrachomatisinfectiona.dtheglycogenassayisconsideredasafast.easyandeconomicalmethylKEYWORDS:Chlamycliatracfiomatis;Glycogenassay;PCR;CelIculture;Clearview中图分类号:R374文献标识码:A沙眼表原体可导致非淋菌性尿遭炎.据报遭，全世界每年有5千万例泌尿生殖道沙眼衣原体感染u】・口前我国有些地区非淋菌性尿道炎发病率已超过淋病，位居第一•此外，沙跟衣原体感染还可引起妇女不孕，胎儿流
5、产，附件炎等病症•尤其在女性患者中沙眼衣原体感染最初无症状或症状较轻，常被忽视，最终发生严重的台并症•因此，建立简便，快速，皱感，特异的检测方法，加强非淋菌性尿道炎的病原体检测•已成为日趋重要的课题•本研究旨在通过对几种检测方法的比较，进一步探讨各方法的优劣及在临床诊断方面的实用价值.1材料与方法11临床标本1999年4月〜2000年6B在北京大学第三医院皮肤科就诊的女性患者富颈拭子标本81倒.12细胞培养用材料McCoy细胞:日木东京自治医科大学飞田教授惠赠标准毒^:ColoradoUniversity.MeGnator教授惠赠.DMEM,小牛血清:Gibeo公司产品•放线苗
6、酮：Servk公司产品.13PCR试荆及仪器Taq酵:Promeg〜产品dNTP:Sig—Tlla产品•弓1锄:臼be哪m公司台成.蛋白酶K:Merch公司产品.PCR仪:Preci-onscientific,US14糖原试验试剂及仪器葡萄糖，硫酸,KOH,无水乙醇，蔥酮均为国产试剂.721分光光度计:上海第三仪器厂.15透明窗试剂盒进口试剂盒.16方法161标本的采集用棉签先攘去宫颈口分泌物,然后用长棉拭子于宫颈内i〜2cm处取材，捻转拭于以刮取上皮细胞•取出拭子放入irnl运｛筍液（蔗糖磷酸盐缓冲液，其中含100u/ml链霉索,50・g/〜万古霉索和5g,ml两性霉索B中，
7、柑管壁挤压拭子使细胞进入运｛自液，弃去拭子.标本液置一20°C保存.细胞培养用标本需在24h内接种细胞.1.62细胞培养法接常规方法传代McCoy细胞,选择已铺满单层的McCoy细胞，弃去原细胞培养液，用含放线菌酮的PBS洗3次,接种经超声波细胞粉碎仪处理过的待检标本0.2ml,3000i7min离心60min,加生长液4ml,生长液为87%（体积分数）DME〜,iO%f体积分数）小牛血清,1%（体积分数）链霉索（100u/ral）,l%（体积分数）两性霉素B（0.25陷/ml）及1%（体积
