三七姜挥发油抑制cne-2细胞增殖的研究

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1、qUllIIIIllLIqllllllllllllllllqlllllLIIIIIIY2606958独创声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含未获得(注；如遗查墓丝盂蔓犍墨I』直咽的!奎拦亘窒2或其他教育机构的学位或证书使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。-，_Ⅳ．‘学位论文作者签名：步孝签字日期：刀华年勿月基日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解桂林医学院有关保留、使用学位论

2、文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权桂林医学院可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同时授权中国学术期刊(光盘版)电子杂志社、中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》、《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)-牙．学位论文作者签名：上9q导师签字：铃-勤签字日期：刃r妒年易月8日签字日期：二D，争年6月2日目录三七姜挥发油抑制CNE．2细胞增殖的研究⋯⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1ABSTRACT⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3英汉缩略词对照表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯6日IJ舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯131．1实验材料与仪器⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯131．2肿瘤细胞系⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯141．3挥发油的提取⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯151．4实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯152结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯262．1三七姜挥发油对不同肿瘤细胞生长抑制作用⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯262．2三七姜挥发油对CNE．2细胞株生长抑制作用⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯272．3三七姜挥发油对CNE．2肿瘤细胞株凋亡形态影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯282．4流式细胞仪检测CNE．2肿瘤细胞株的凋亡⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯292．5流式细胞测定三七姜挥发油对CNE．2肿瘤细胞株周期的影响⋯⋯312．6三七姜挥发油对CNE一2肿瘤细胞株内活性氧自由基(ROS)含量的影响⋯⋯⋯⋯

5、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯332．7三七姜挥发油对CNE．2肿瘤细胞株内线粒体膜电位A1lrrn变化⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯352．8三七姜挥发油对CNE．2肿瘤细胞株Caspses．3、Bcl．2编码基因相对表达水平的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯373讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4014结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯44参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯45综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

6、⋯⋯⋯⋯⋯49攻读学位期间发表的学术论文目录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯62致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯63三七姜挥发油抑制CNE．2细胞增殖的研究中文摘要目的：研究三七姜挥发油对人鼻咽癌细胞株(CNE一2)生长的抑制作用及其作用机制。方法：实验采用人鼻咽癌细胞株CNE．2，三七姜挥发油实验组分为120I-tg·mL～、240pg·mL～、360I-tg·mL一、480ktg·mL～，作用24h后进行相关检测。运用MTT法检测三七姜挥发油对CNE．2增殖抑制作用以及IC50；Hoechst33258荧光染色法观察三七姜挥发油作用于CNE．2

7、发生凋亡时细胞形态的变化；FITC．AnnexinV-PI双染流式细胞仪检测三七姜挥发油作用于CNE．2后的细胞凋亡率的变化；PI染色流式细胞仪检测三七姜挥发油对CNE一2周期的影响；流式细胞术检测细胞内活性氧自由基(ROS)含量；采用JC一1染色检测CNE．2细胞内线粒体膜电位(AWm)的变化情况；RT-PCR技术检测凋亡相关基因caspase．3、bcl．2编码基因表达水平。结果：三七姜挥发油对CNE．2细胞增殖具有抑制作用，且呈剂量依赖性和时间依赖性，作用24h后CNE一2细胞的IC5