srta大肠杆菌系统表达opg及功能研究

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1、安徽大学硕士毕业论文D201102090入学时间：2鱼量童年窆月导师姓名：直越职称／学位：巫塞旦么盟±副导师姓名：划筮握职称／学位：副婴塞员么盟±完成时间：201L——年5月独创性声明＼删本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得安徽大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：签字日期：加脚年6月多日学位论文版权使用授权书本学位论文作者

2、完全了解安徽大学有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权安徽大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文作者签名：陈孺、，导师签名：签字日期：如f毕年占月6曰签字日期：)田哗年6茂多甚致谢时光飞逝，如今的场景让我还以为是三年前的大学毕业，三年的研究生生涯即将过去。三年中，我从合肥来到北京，感触颇多。这三年中充满了酸甜苦辣，回首百味，才觉珍惜。首先谨以最诚挚的敬意感谢我的导师高斌研究员

3、，从选题立题、实验设计到具体实验、结果分析直至文章撰写和论文的修改都凝结了导师的心血和智慧结晶。高老师严谨的治学态度、渊博的知识、创新的思维和敏锐的洞察力是我学习的榜样。在次感谢刘长振副研究员在实验和生活中给我的帮助。可以说是刘老师将我带进了科研的大门，不论是实验中的指导还是写作上的教导，都让我收益匪浅。非常感谢高斌课题组马娟、李伟和陶华老师在我的学习和工作中给予的许多指导和帮助。感谢孟庆兰女士默默地为我们准备干净的实验材料，维持一个清洁的工作环境。感谢我们课题组与我朝夕相处的同学们王磊、赵云峰、瞿明胜、王力飞、崔红莲、BhargaviM．Bomah、张鸽、韩化敏、牛

4、歌、李晓梅、倪佳、马盼、何琛辉、顾超逸、MikaelaBlomberg和NiklasvonMatem等。特别感谢赵云峰师兄在实验上给予的指导和帮助。不仅感谢安徽大学生命科学学院的老师，也感谢中科院微生物的各位老师在这几年之中给予的帮助感谢出席硕士论文答辩的各位专家、教授在百忙中给予的指导。感谢我的家人对我的支持和鼓励。摘要骨保护素作为OPG依ANKI，瓜ANK信号通路的重要分子之一，参与了骨重建、免疫功能发育、血管疾病发生和乳腺组织的发育等一系列生理学功能。目前重组OPG的主要表达方式为昆虫杆状病毒表达体系和哺乳动物细胞表达系统。迄今为止还没有原核表达系统表达OPG的

5、研究报道。在本研究中，我们利用SrtA大肠杆菌表达系统成功获得了具有生物学功能的OPG。该OPG具有RANKL和TRAIL的结合活性，表面等离子共振(SPR)技术测定表明其亲和力分别为8．2nM和88。7nM。随后的破骨细胞分化实验和细胞凋亡实验证明该OPG具有抑制破骨细胞分化能力和抑制TRAIL诱导的细胞凋亡能力。关键词：OPG，RANKL，TRAIL，亲和力，破骨细胞，细胞凋亡AbstractOsteoprotegrin(0PG)isaimportantroleoftheOPG／】爻A小毗／I己ANKpathwatinregulationofboneremodel

6、ing，immunefunction，vasculardiseaseandmammaryglanddevelopment．RecombinantOPGwasexpresSedbybaculovirus．infectedinsectsystemandeukaryoticexpressionsystem．TherehasbeennoreportSOfarfortheexpressionofOPGwithaprokaryoticexpressionsystem．Inthisstudy，wehavesuccessfullyobtainedfunctionalOPGbysort

7、aseAaidedE．colisystem．TherecombinantOPGcouldbindtoRAN口8：LandTRAIL．Thebindinga街nitvof0PGforRAⅫ