广州市吸毒强戒人员hiv感染流行病学调查及基因型分析

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1、南方医科大学同等学力硕士学位论文广州市吸毒强戒人员HIV感染流行病学调查及基因型分析TheepidemiologicalsurveyandgenotypeanalysisagainstHIVfromdrugusersinGuangZhou课题来源:自选课题专业名称学位申请人指导教师答辩委员会主席答辩委员会成员论文评阅人临床检验诊断学石泽林吴炳义教授吴晓蔓教授刘华章副主任医师裘宇容教授郑磊教授曾方银教授2012年11月20日广州硕士学位论文广州市吸毒强戒人员HIV感染流行病学调查及基因型分析硕士研究生:石泽林指导教师:吴炳义教授摘要研究背景和目的HIV病毒已经对全球人类的健康造成严重

2、威胁,成为全球关注的热点。HIV-1是引起全球艾滋病流行的病原体,目前还没有针对HIV-I的疫苗,早期诊断和制定预防措施是防止HIV-1传播的关键。静脉吸毒者是HIV高发人群,而且在吸毒者之间的流行和传播比较严重,要想制定预防措施,了解其详细的特征极其重要。因此本研究的目的是了解吸毒强戒人群中HIV的感染情况以及影响H1V感染的相关危险行为学特征,分析吸毒人群HIV感染者中HIV-I的基因序列特征,确定其感染的基因亚型分布和各亚型的流行趋势。研究方法研究对象为2010年1月-2010年12月期间在戒毒管理局医院接受治疗的强制戒毒人员1085名,其中包括男性822例,女性263例,年

3、龄从16岁至49岁。使用自行设计的调查问卷,对戒毒人员进行一对一的问卷调查,内容包括戒毒者的社会行为学特征,如姓名、年龄、职业、文化程度以及籍贯;吸毒方式、吸毒时问以及是否共用注射器等戒毒人员的吸毒相关因素;同时调查性行为与HIV感染相关的影响因素,包括婚姻状况、性伴侣人数和安全套使用情况。每例研究对象采集2ml静脉血,加入EDTA.K2抗凝管中,按照卫生部中国疾病预防控摘要制中心2009年发布的《全国艾滋病检测技术规范》的有关要求检测血浆中的HIV抗体,抗体初筛使用酶联免疫吸附试验方法,初筛阳性的送广州市疾病预防控制中心,使用免疫印迹法进行确认实验,若免疫印迹法确认为阳性定义为H

4、IV感染,最终结果使用SPSS13.0软件,分类资料使用行×列表卡方检验,等级资料用线性趋势检验,阳性事件的影响因素分析采用Logistic回归模型,P<0.05为差异有统计学意义。从HIV确认阳性的标本中随即抽取36例,从初筛阴性的样本中抽取15例,共51份样本,采集全血样本2ml,加入EDTA.K2抗凝管中,使用德国凯杰试剂盒进行基因组DNA的提取,用紫外分光光度计检测核酸浓度和纯度。在Genbank中查找HIVgag基因的序列,序列号为NC001802,按照引物设计的基本原则,使用软件primerpremier5.0设计引物,并使用Oligo6.0进行引物评估,在NCBI中进

5、行blast以验证引物的特异性,设计的引物包括外引物和内引物,其中外引物为引用文献的引物,外引物的扩增片段长度为1243bp,内引物的扩增片段长度为290bp,所有引物均在英潍捷基公司合成。使用外引物和内引物进行巢式PCR,PCR以后进行琼脂糖凝胶电泳,若有目的条带,送去华大基冈公司进行测序,测序结果使用软件Chromas2进行分析,并通过美国拉莫斯国家实验室HIV核酸数据库的BLAST工具与国际参考毒株进行比对,确认所属HIV的基因亚型。研究结果在调查的1085名广州市吸毒强戒人员(HIV确认阳性107名,阳性率为9.86%):本调查中包括男822名,女263名,户籍主要分布在广

6、东、广西、湖南、湖北及四川省;年龄16--49岁,以20~30岁和3叫0岁居多,分别占总人数的百分比为26.9%和46.4%,相应地HIV感染的阳性率也居多,3¨0岁年龄组阳性率最高,为10.9%,进行线性趋势检验,吸毒者各年龄组与HIV感染率无显著线性趋势睁2.040,P=0.154);男性的感染率为10.8%,女性的感染率为6.8%,差异无统计学意义货-3.560,P--0.059)。学历中以初中文化程度的人数最多,占n硕士学位论文72.4%,其次为高中、中专文化,占18.9%,不同文化程度HIV感染的阳性率不同,文化程度越低HIV感染的阳性率越高,对不同文化程度所导致的感染率

7、进行了线性趋势检验,结果表明HIV感染率与文化程度的下降呈线性相关(f=13.85,P<0.001)。在所调查的所有戒毒者中有88.1%以吸食海洛因为主,有1015名(占93.6%)吸毒者开始吸毒的方式为口服,随着时间的延长,有706名(占65.1%)发展成为静脉吸毒,其次是烫吸和口鼻吸,采用注射方式者H1V感染率为12.3%,烫吸组为6.o%,口鼻吸组为3.2%,三者之间有显著性差异货=14.413,P=0.001)。在静脉吸毒者中有446名存在共用注射器行为,占6

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