中国明对虾雌性蛋白的纯化方法及性质研究

《中国明对虾雌性蛋白的纯化方法及性质研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、河北大学硕士学位论文中国明对虾雌性蛋白的纯化方法及性质研究姓名：梁晓辉申请学位级别：硕士专业：水生生物学指导教师：谢松20050601摘要利用常规层析法(SephadexG．150和DEAE．Cellulose一32)以及一种改进方法(EDTA--M92+沉淀、电沈脱)两种途径纯化了中国明对虾的成熟卵巢中的卵黄蛋白，利用电洗脱法纯化了其卵和幼体中的卵黄蛋白。对卵巢中卵黄蛋白的研究表明：该蛋白是一种糖脂磷类胡萝h素蛋白，总分子量为409ku，等电点为5．4，含糖量8．7％，具有5个亚基(202ku、171ku、105ku、80ku和73ku)，亚

2、基之间有1个二硫键。卵中的卵黄蛋白总分子量为404ku，有6个亚基"(202ku、188ku、171ku、105ku、80ku和66ku)：幼体(N4期)体内卵黄蛋白总分子量为390ku，有5个亚基(202ku、188ku、171ku、105ku、80ku)。从卵巢到卵再到无节幼体N4期，卵黄蛋白的亚基组成是变化的，其间可能经过了亚基重排或者其他修饰过程。制各了中国明对虾卵黄蛋白的抗血清并运用免疫学方法从成熟雌性中国明对虾血淋巴中检测到了卵黄蛋白原。利用层析(DEAE-Cellulose--32)或改进方法——EDTA--Mg”法对中国明对虾血

3、淋巴处理后再用电洗脱法纯化了中国明对虾的卵黄蛋白原。中国明刑‘虾卵黄蛋白原是一种糖脂磷类胡萝h素蛋白，总分子量为476ku，等电点5．2，含糖量11．6％，具有3个亚基(171ku，94ku，80ku)，亚基之间未发现二硫键。卵黄蛋白原比卵黄蛋白更加不稳定。分别用柱层析(DEAE--Cellulose--32)和电洗脱法提纯了克氏原螯虾卵巢的卵黄蛋白。克氏原螯虾卵黄蛋臼也是一种糖脂磷类胡萝h素蛋白，总分子量为481ku，等电点为5．6，含糖量19．8％，具有6个亚基(198ku、176ku、132ku、11lku、92ku、82ku)，亚基之间

4、有1个二硫键。比较了中国明对虾卵黄蛋白和克氏原螯虾卵黄蛋白部分生化性质的异同。关键词：中国明对虾；卵黄蛋白原；卵黄蛋白；纯化：性质PurificationandCharacterizationoftheFemaleSpecificProteinintheMarinePrawn，FenneropenaeuschinensisAbstractApurifiedvitellinwasfsolatiedfromthematureovariesofthemarineprawn，Fenneropenaeuschinensiswithtwometods：ch

5、romatography(SephadexG一150andDEAE—Cellulose一3．2)andamodifiedmethod(EDTA—M92+precipitationandelectroelution)，thevitellinsinovaandnaupliuslarvae(N4stage)werepurifiedwithelectroelution．Thevitellininovarieswasalipo-glyco—phospho—caroproteinonthebasisofexperimentalresults，withana

6、pparentmolecularweightof409ku．Itsp1was5．4．containing8．7％oligosaccharides．Fivesubunits(202ku，171ku,105ku，80ku和73ku)andonedisulfidebondweredetected．Sixsubunits(202ku，188ku，171ku，105ku,80ku，66ku)werefoundinthevitellinofova，andtheapparentmolecul．arofthisproteinwas404ku，highertha

7、nthevitellinoflavae(390ku)inwhichfivesubunits(202ku，188ku，171ku，105ku，80ku)weredetected．Subunitsofthevitellinsoftheovaries，ovaandnaupliuslarvaevariesinnumber．Thisphenomenonmightberelatedtothesubunitsrearrangementorothermodifications．Inthisexperiment，thepurifiedvitellinwasuse

8、dasantigentoproduceantiserumfromarabbit．Withtheantiserum，vitellogeninwasdet