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《番木瓜proteinase omega 基因启动子地克隆及功能初步研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、云南植物研究2005,27(5):545～551ActaBotanicaYunnanica番木瓜proteinaseomega基因启动子的克隆곘及功能初步研究곘곘1,21杨英军,周鹏(1中国热带农业科学院热带生物技术研究所、热带作物生物技术国家重点实验室,海南海口571101;2河南科技大学,河南洛阳471003)摘要:采用PCR技术从番木瓜基因组中克隆了proteinaseomega基因的部分序列及其5′侧翼序列。序列分析表明,克隆到的基因序列与GenBank中的序列同源性为96%,长1039bp的5′端
2、侧翼序列在GenBank数据库中没有同源片段。预测5′端侧翼序列有两处基础启动子区域,转录起始位点(TSS)分别为是A,T。在基础启动子区域都存在TATA-box,上游发现多处CAAT-box,G-box,I-box等顺式作用元件和AT富含区。构建了植物表达载体并用基因枪轰击番木瓜的叶组织,GUS基因瞬间表达结果表明,该长1039bp的5′端侧翼序列具有驱动GUS基因在乳管中表达的功能。该启动子的发现对进一步研究启动子的功能和开发番木瓜作为生物反应器具有重要意义。关键词:番木瓜;proteinaseomeg
3、a;启动子;克隆;序列分析中图分类号:Q75文献标识码:A文章编号:0253-2700(2005)05-0545-07CloningandFunctionalAnalysisofaNovelProteinaseOmegaPromoterfromCaricapapaya1,21**YANGYing-Jun,ZHOUPeng(1NationalKeyBiotechnologyLaboratoryforTropicalCrops,InstituteofBioscienceandBiotechnology,CATA
4、S,Haikou,571101,China;2HenanUniversityofScienceandTechnology,Luoyang471003,China)Abstract:Proteinaseomegawasakindofproteinaseinpapaya(CaricapapayaL.)laticifers.A5′flankingsequenceandpartialgenesequenceofproteinaseomegawereisolatedfromthegenomicDNAviaPCRtec
5、hnology.DNAsequenceanalysisandhomologycomparisonindicatedthatithad96%homologywiththeproteinaseomegagenewhichhadbeensubmittedtoGenBank.ThetwocorepromoterregionsandsomeupstreamregulatoryelementsinthefragmentwereanalysedusingthesoftwareofPROMOTERPRE-DICTIONan
6、dPLANTCARE.Transcriptionalstartsites(TSS)wereA,Trespectively.TATA-box,CAAT-box,G-box,I-box,ATrichregionsandothercis-elementswerefoundinthepromoterinidenticalpositionscommontoallpromotersequenceregions.ComparedwiththedatainGenBank,theresults곘基金项目:国家“863”计划资
7、助课题(2002AA241141),国家转基因植物研究与产业化开发(JY04-B-02)和中国热带农业科学院基金资助课题(RKY0419)곘곘通讯作者:Correspondingauthor.E-mail:zhqtw@public.hk.hi.cn.Tel:0898-66988564收稿日期:2005-03-11,2005-04-18接受发表作者简介:杨英军(1968-)男,副教授,在职博士研究生,主要从事植物生物反应器的研究工作。546云南植物研究27卷showedthatanewpromoterwaso
8、btained,anditsGenBankaccessionnumberwasAY695444.Binaryvectorswereconstructedthroughfusing1039bp5′flankingregionofproteinaseomegagenewiththeGUSgene,TransientGUSexpressionswereobservedinpapayaleavestransferredv
