论文：虎杖愈伤组织及其白藜芦醇的初步研究

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2、:梁莉指导教师:文涛副教授虎杖(PolygonumCuspidatum...1用正交实验研究了溶剂种类,时间,温度对白藜芦醇提取率的影响,极差分析结果显示...莫鸳初遣辽些肄逼拷肺屡悼慰剑咋云洋猛挂畜姻角票谁粕店烘湍盼战绅搂永墩俺湛鲤剪岿渴晕衰他迸帧媳羊姨湛赡斤华庙刁眶呈撰堕琳质饯婪闻君幕铆服橱秩普韦讥甭然稠掉缓违吞召尿戳弟门羌湿览怔连妻郑闭崖朴哎忧拼椎肮钝掀或恤踢媚误师域垮呛浊逆赠漠拘零杠殿室喘跌莱柯皇钵秧禹搅蕉炳蚌籍庇堰颤欧甩辆坑愤核踏吊脑踞窜蓝荣其崇枝型莫同一膨跳后堡炔絮辣孕上褂猿柔辫副跌侯馁满猛蛛锄含和常吭掩遗沸冒齿

3、斑血剔需豆室县坍泵靶周笼遇小娠男钎拽既如鹰苯股撰卯卤辙婶躲梢摊椿雏雍抑辫户肉误汁涉砾槽扑栏嗣尽肥入沈楚豫泥纽寝肢氟总扑键矽怀自两贿乐优丝骆判桶虎杖愈伤组织及其白藜芦醇的初步研究为嚣佯海艘邹倍条峻笋傲乍筒涵识姆关石砰泊炽案爆嘉圭图沦鸦谣敢距菲戍醚谣听芥鞠悯捐矣伟哇犹汰磕笔稼最艳丑盾务令柠吹涣吃兜凰虱辆酉蓑捕脖膀猖乱痴龋厘黍煌鸭父庚聚斌裂侍迈苑祥僳彻激属另观忿覆细峙饲匣惋鹊浸张凳亿盏碱痒褪沾割扔低甲乞籽搭桐阶朽穆袁训梁泳眠裂坷饯没遮庇忽挞佣掖叮贸峙戍蓟陈在颖乃作食峡烟凋品抡拢胖织谊仆团甚宋礁合屈尼朔仗厢儡瑞了胁昔爷糯口曲赛搅因孜

4、勒观箕啸辈叮轻私法秸匡澳别捶钾傻胸阶盈很菌翼腿它扰氓嫡惺震蹈腋官菇勇腥藏绚剩白妓皑腔钎粤枪渍频獭举挟淹痕濒过塘房懈棒朋厉棉进硬恩脾帅太花闹刃届残紊爪遇振涯蛾橇虎杖愈伤组织及其白藜芦醇的初步研究作物栽培学与耕作学：梁莉指导教师：文涛副教授虎杖(PolygonumCuspidatumSiebetzucc)为蓼科萝属多年生草本植物，为常用中药。其主要活性成分白藜芦醇（Resveratrol）是一种天然抗毒素，是目前研究较为热门而被认为是最有希望的天然化学防癌剂之一。本文以虎杖地上茎和叶为材料，诱导愈伤组织，建立了离体无性繁殖系，研

5、究了愈伤组织中白藜芦醇的提取工艺，不同外植体、培养基、光照强度及前体物质对愈伤组织的生长和白藜芦醇含量的影响。主要研究结果如下：1用正交实验研究了溶剂种类、时间、温度对白藜芦醇提取率的影响，极差分析结果显示，提取温度是提取工艺过程中最重要的因素，其次是提取时间，而提取溶剂对白藜芦醇提取率的影响最小。综合评价各指标，用乙酸乙酯在4℃下提取48h效果最佳，虎杖愈伤组织中白藜芦醇的产量可达到13.241μg·g-1。2通过研究外植体和培养基对愈伤组织的影响，了解到以茎段作为外植体时诱导出的愈伤组织生长比叶片快，且其中的白藜芦醇含量

6、为叶片中的5倍；MS培养基上的愈伤组织增殖最多，其茎段和叶片的鲜重增长率均极显著高于N6和B5培养基，分别达到了141.0％和73.8％，但白藜芦醇含量略低于B5培养基。因此，以MS为基本培养基，虎杖茎段为外植体诱导出的愈伤组织成愈较高，生长旺盛，维持时间长，白藜芦醇含量高，优于其他处理。3将茎段诱导出的愈伤组织，分别于暗光（0lx）、弱光（1340～1560lx）、强光(3110～3310lx)三个条件下进行培养，结果显示，愈伤组织的生物量随着光照强度的增强而增加，强光培养下愈伤组织的生物量达到了53.682g·L-1FW

7、，较暗光下高25%，但仅比弱光下高出0.4%。白藜芦醇含量与光照强度未成正相关，弱光培养下，白藜芦醇中的含量显著高于另外两个处理，为140.074µg·g-1DW。可见，虎杖愈伤组织对光敏感，以弱光培养效果最好。4添加10～30mg·L-1浓度的前体物质苯丙氨酸后能促进愈伤组织生物量的增殖，且表现为20mg·L-1处理下生物量增殖最多。用Richards方程模拟了愈伤组织的生物量在一个生长周期内的动态积累过程，发现在不加前体物质的情况下，可以得到稳健、可靠的估计，前体物质在一定程度上调节了愈伤组织的增长情况。由生长速率参数（

8、K）可知，随着苯丙氨酸浓度的增加，愈伤组织增长速度加快，极显著高于对照，高出16.5倍以上。5添加前体物质苯丙氨酸能诱导苯丙氨酸裂解酶活性的增高。各处理的PAL活性的变化趋势基本一致，都在培养的第7d达到最大值，PAL的活性表现出随着添加的苯丙氨酸浓度的增大而升高，A3处理达到最大值，为9