大蒜素对人胃癌sgc--7901细胞株p38 mapk、caspase--3表达的影响

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1、温州医学院硕士学位论文大蒜素对人胃癌SGC--7901细胞株P38MAPK、Caspase--3表达的影响姓名：葛小刚申请学位级别：硕士专业：外科学指导教师：郑志强2012-05-19温州医学院硕士学位论文大蒜素对人胃癌8GC-7901细胞株p-P38、Caspase-3表达的影响目的：1．观察不同浓度大蒜素(garlicin)对人中分化胃腺癌细胞株SGC-7901细胞增殖抑制情况及凋亡诱导情况；2．研究大蒜素对胃癌细胞SGC一7901的作用及其与P38mRNA及caspase-3mRNA表达的关系，探讨大蒜素对胃癌细胞凋亡因子基

2、因表达的可能作用机制。3．研究大蒜素对胃癌细胞p-P38及caspase3蛋白表达的关系，探讨大蒜素对胃癌细胞凋亡因子蛋白表达的可能作用机制。方法：1．将培养细胞分为对照组(普通培养液组)、大蒜素作用组(分为不同浓度组：5．OIJg／mL、10．0Ug／mL、20．0IJg／mL、40．0}

3、g／mL)，各组均在加入等量普通培养液或大蒜素，分别作用24、48、72h后，采用四甲基噻唑氮蓝(Methylthiazolyltetrazolium，MTT)法检测细胞增殖抑制情况；光镜和AO／EB染色荧光显微镜观察细胞凋亡形态学改变。2．

4、以不同浓度大蒜素(5．0IJg／mL、10．0lJg／mL、20．0IJg／mL、40．0Ug／mL)作用SGC一7901细胞72h后，提取总RNA，通过逆转录一聚合酶链反应(ReverseTranscription—PolymeraseChainReaction，RT—PCR)方法检测各组P一38mRNA及caspase一3mRNA表达情况。3．以不同浓度大蒜素(5．OUg／mL、10．0Ug／mE、20．0I

5、g／mL、40．OUg／mL)作用SGC一7901细胞72h后，提取总蛋白，通过Westernblot检测细胞相关p-

6、P38及Caspase一3蛋白表达的水平。结果：1．大蒜素抑SUSGC7901细胞生长，对照组与大蒜素作用组之间，抑制率具有显著性差异(P<0．05)。大蒜素作用组内，不同浓度、不同时间大蒜素作用下，可发现抑制率具有浓度及时间依赖性。AO／EB染色发现大蒜素作用下，胃癌细胞凋亡明显增加(P

7、P—P38、Caspase-3蛋白表达量显著性增加(P<0．05)，并且随着药物浓度的增加，增强作用更温州医学院硕士学位论文?，一；一日湿，呈浓度依赖性。南二釜能够抑制胃癌细胞SGC-7901增殖、诱发凋亡，且随着浓度及作用时间≮艺而变化，呈浓度和时间依赖性；．，豢可增加P38及caspase3基因及蛋白表达，可考虑大蒜素通过增加P38Ⅺse3的表达而抑制胃癌细胞SGC-7901增殖、诱发其凋亡。其机制可一。．，0,038MAPK通路诱导P—P38增加，Caspase一3表达增加最终导致凋亡。紧诩：大蒜素；胃癌细胞SGC一7901

8、；增殖抑制；凋亡；Caspase一3mRNA，P一38EffectsofAllicinonp-p38andCaspase--3expressionofhumangastriccancercellsSGC—-7901Abstractobjective：1．ToobservetheproliferationinhibitionandapoptosisinducingsituationofthehumangastriccancercellSGC．7901whicheffeetedbyAllicinofdifferenteoncentra

9、tion．2．ToobservetherelationshipbetweentheefficionofAllicintogastriccancercellsandtheexpressionofcaspase一3mRNAandP38mRNA。3．ToobservetherelationshipbetweentheefficionofAllicintogastriccancercellsandtheexpressionofcaspase-3proteinandp-P38protein，explorethemaybemechanismo

10、fgarlicntogastriccancercells．Methods：1．ThecancercellsweredividedimocontrolgroupanddifferentconcentrationofAllicingroups(2．5I