microrna-30a调控beclin-1对乳鼠心肌细胞缺氧复氧诱导自噬作用

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1、解放军医学院研究生学位论文原创性声明秉承我院“忠诚、敬业、和谐、创新”的学风，本人声明：所呈交的论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不含为获得我院或其他教育机构的学位及证书而使用过的材料，对本文的研究作出贡献的个人或集体，均已在文中做了明确的说明并表示谢意。申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担一切相关责任。论文作者签名：日期：指导教师签名：日期：解放军医学院研究生学位论文版权使用授权书本人保证毕业离院后，发表论文或使用论文工作成果时署名单位为解放军医学院或解

2、放军总医院。学院有权保留并向国家有关部门或机构送交论文原件、复印件和电子版本，可以采用影印、缩印、扫描或其它手段保存论文以供被查阅和借阅。学院可以公布学位论文的全部或部分内容（保密内容除外）。论文作者签名：日期：指导老师签名：日期：目录中英文缩略词表………………………………………………………………………1中文摘要………………………………………………………………………………3Abstract………………………………………………………………………………..5前言……………………………………………………………………………………7第一部分miR-30a在乳鼠心肌细胞缺氧/复氧后的表达变化………

3、…………….11材料与方法…………………………………………………………………………..11结果…………………………………………………………………………………..17第二部分miR-30a腺病毒表达载体构建及感染乳鼠心肌细胞…………………..19材料与方法…………………………………………………………………………..19结果…………………………………………………………………………………..28第三部分miR-30a调控Beclin-1对乳鼠心肌细胞缺氧/复氧诱导自噬的作用…31材料与方法…………………………………………………………………………..31结果………..…………………………………

4、……………………………………....40讨论…………………………………………………………………………………..44参考文献……………………………………………………………………………..48综述…………………………………………………………………………………..50在读期间发表论文…………………………………………………………………..64致谢…………………………………………………………………………………..65解放军医学院硕士学位论文中英文缩略词表英文缩写英文全称中文全称miRsmicroRNAs微小RNAmiR-30amicroRNA-30a微小RNA-30aSDSSodiumDodec

5、ylSulfate十二烷基硫酸钠CTthresholdcycle循环阈值DEPCdiethylpyrocarbonate焦碳酸二乙酯BSABovineSerumAlbumin牛血清白蛋白EDTAethylenediaminetetraaceticacid乙二胺四乙酸mRNAmessengerribonucleicacid信使核糖核酸bpbasepair碱基对PBSPhosphateBufferedSaline磷酸盐缓冲液PCRPolymeraseChainReaction聚合酶链反应ODopticaldensity光密度H/Rhypoxia/reoxygenation缺氧/复氧3’UT

6、R3’untranslatedregion3’非翻译区AMIAcutemyocardialinfarction急性心肌梗死FITCFluoresceinisothiocyanate异硫氰酸苯酯DMEMDulbecco’sModifiedEagle’sMediumDulbecco改良必需培养基1解放军医学院硕士学位论文2解放军医学院硕士学位论文microRNA-30a调控Beclin-1对乳鼠心肌细胞缺氧复氧诱导自噬的作用中文摘要目的观察microRNA-30a(miR-30a)在乳鼠原代心肌细胞缺氧复氧处理后的变化，并探讨miR-30a调节缺血/再灌注诱导的心肌细胞自噬的分子机制。方法

7、与结果（1）构建乳鼠心肌细胞缺氧/复氧（hypoxia/reoxygenation,H/R）模型，利用realtime-PCR技术精确定量对照组和H/R组miR-30a的表达水平，结果显示H/R可诱导miR-30a表达下调（71.9±2.6）%，P＜0.01。（2）重组构建腺病毒表达载体（AD-rno-miR-NC、AD-rno-miR-30a及AD-rno-miR-30a-inhibition）感染原代乳鼠心肌细胞，使其过表达或低表达miR-