不结球白菜nrt2基因的表达模式分析及其家族分子进化研究

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1、EXPR卫SSIONPATTERNANALYSIS0FA碾22GENEINNoN．HEADINGCHINESECABBAGEANDMOLECULAREVoLUTIoNoFⅣR刀GENEFAMILYByKongMinSupervisedbyProfessorHouXi—LinTheDissertationSubmittedtoNanjingAgriculturalUniversityInPartialFulfillmentoftheRequirementsForMasterDegreeofAgricultureSciencesCompletedi

2、nMay,2012CommencementinMay,2012原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体己经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者(需亲笔)签名：孔敏加f啤，月7日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借

3、阅。本人授权南京农业大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编学位论文。保密口，在——年解密后适用本授权书。本学位论文属于不保密≤(请在以上方框内打“√”)学位论文作者(需亲笔)签名：孑L各众导师(需亲笔)签名：仇勿样I加lL年J月／日、训r蛑嵋7日目录录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯i摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯I—dI。BSTRACT⋯．⋯⋯．⋯．⋯．⋯⋯．⋯．⋯．⋯．⋯．⋯．⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯．⋯．⋯⋯．．⋯．

4、⋯．⋯．．⋯．⋯．．．⋯⋯．．III缩略词表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一V前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯VII翮吾⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．第一部分文献综述第一章植物中硝酸盐转运及NRT2家族的进化研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．11植物中硝酸盐转运研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯11．1土壤中的硝酸盐⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．11．2根吸收硝酸盐⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

5、⋯⋯⋯⋯．．21．3硝酸盐转运的调节⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．51．4硝酸盐转运子参与根的形态建成和信号感受⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．81．5小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．92NRT2家族的进化研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯10参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．12第二部分研究报告第二章不结球白菜NRT2基因的克隆及表达模式分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯】9l材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．211．1材料及其硝酸

6、盐处理⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯211．2RNA的提取及cDNA的合成⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯211．3不结球白菜NRT2基因的克隆⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．221．4序列分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯221．5实时定量PCR反应⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯221．6黄色荧光蛋白(YFP)融合载体的构建⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．231．7不结球白菜原生质体分离和转化⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯232结果与分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．242．1不结球白菜BcN

7、RT2基因全长的cDNA克隆和序列分析⋯⋯⋯⋯242．2硝酸盐处理对BcNRT2表达的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．272．3BcNRT2蛋白质的原生质体亚细胞定位⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．28不结球白菜NRT2基因的表达模式分析及其家族分子进化研究3讨{仑⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯28参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．30第三章植物NRT2家族的分子进化研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯331材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．35

8、1．1序列的获得⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯351．2共线性分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯351．3进化树分析⋯