不结球白菜晚抽薹BcFLC1基因克隆及表达分析

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1、南京农业大学学报2010,33(6):23-27JournalofNanjingAgriculturalUniversityhttp://nauxb.njau.edu.cn荣子龙,侯喜林,史公军,等.不结球白菜晚抽薹BcFLC1基因克隆及表达分析[J].南京农

2、业大学学报,2010,33(6):23-27不结球白菜晚抽薹BcFLC1基因克隆及表达分析*荣子龙,侯喜林,史公军,肖栋,郝慧楠(南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室/农业部南方蔬菜遗传改良重点开放实验室,江苏南京210095)摘要:采用RT-PCR、5'RACE和3'RACE方法,克隆得到了不结球白菜NJ074晚抽薹基因(BcFLC1)的cDNA全长序列。对BcFLC1基因所编码氨基酸序列的理化性质进行分析推测得到:该基因cDNA全长909bp,包含576bp的开放阅读框,编码191个氨基酸。不结球白菜BcFLC1蛋白功能域预测分析结果表明:该基因为MADS盒基因,其

3、编码蛋白的1~60氨基酸属于MADS盒基因蛋白。荧光定量PCR分析表明:BcFLC1基因在不同生长发育阶段叶片中的表达情况不同,抽薹前高于抽薹后叶片中的表达量。BcFLC1基因在不同部位表达也存在差异,表达量从高到低依次为:叶、茎、花蕾、花和根。关键词:不结球白菜;FLC基因;实时定量PCR;表达分析中图分类号:S634.3文献标志码:A文章编号:1000-2030(2010)06-0023-05CloningandexpressionanalysisoflateboltingBcFLC1genefromBrassicacampestrisssp.chinensis*RONGZ

4、i-long,HOUXi-lin,SHIGong-jun,XIAODong,HAOHui-nan(StateKeyLaboratoryofCropGeneticsandGermplasmEnhancement/KeyLaboratoryofSouthernVegetableCropGeneticImprovement,MinistryofAgriculture,NanjingAgriculturalUniversity,Nanjing210095,China)Abstract:A909bpfull-lengthcDNAsequenceofBrassicacampestrisfl

5、oweringlocusC1(BcFLC1)wasobtainedusingRT-PCR,3'RACEand5'RACEstrategies.Thefull-lengthcDNAsequenceof909bpinlengthcontainedanopenreadingframeof576bpencoding191aminoacids,whichhadatypicalMADS-boxgenestructure.Theencodingproteinfrom1-60aminoacidsbelongedtoMADS-boxproteins.Real-timePCRanalysissho

6、wedtheexpressionleveloftheBcFLC1geneinunboltingplant'sleaveswashigherthanthatofboltingplant.Theexpressionlevelofdifferenttissuesinboltingplantshoweddifferences.Theexpressionlevelsfromhightolowareleaf,stem,bud,flowerandroot.Keywords:Brassicacampestrisssp.chinensis;FLCgene;real-timePCR;express

7、ionanalysis不结球白菜原产于我国,是我国南方长江中下游普遍种植的大众化蔬菜。晚抽薹是白菜类蔬菜生产中很重要的农艺性状,也是蔬菜育种的主要目标之一。在拟南芥中基本上明确了控制抽薹开花的主要基因及基因之间的互作关系,其中晚抽薹基因FLC[1]是开花时间调控的开关基因。开花时间还受很多因素调控,包括内源物质影响和外部环境刺激。许多关于控制抽薹开花的基因已经从拟南芥中得到鉴定,主要有光照、春化、自主控制开花和赤霉素4条[2-3]途径促进开花基因的功能表达。其中前2条途径受环境因素的影响,后

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