微流控芯片三维细胞培养模式下肺癌细胞侵袭性伪足形成及转移研究

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1、中图分类号密级微流控芯片三维细胞培养模式下肺癌细胞侵袭性伪足形成及转移研究Studyoninvadopodiaformationforlungcarcinomainvasionwith。“。uidic3DculturedevicewitllamicrolluiClcultureevice计：学位论文：38页表插格：0个图：7幅指导教师：王琪教授申请学位级别：硕士学位王珊珊学科(专业)：内科学培养单位：大连医科大学附属第二医院完成时间：二O一三年五月答辩委员会主席：独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特,另tlD

2、N以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得大连医科大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：呈趟爵签字日期：砌侈年r月矽目关于学位论文使用授权的说明本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权大连医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本学位论文属于(请在以

3、下相应方框内打“√”)：1．保密口，在年解密后适用本授权书。2．不保密回。／黧搠导师签名：黝1日期：矽房年5月弦日日期：矽／；年阳砷日目录一、摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1(一)中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1(二)英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3二、正文⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5(一)前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5(一)RU舌⋯一⋯⋯一⋯⋯””⋯⋯⋯一⋯⋯一⋯⋯“一⋯⋯⋯“⋯“⋯一一5(二)材料和方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯6

4、1．材料····⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··61．1细胞系⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯61．2主要试剂及配置⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯61．3主要仪器⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯82．实验流程⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯93．方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯93．1微流控芯片的设计、制作及处理⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯93．2细胞的培养、传代、冻存和复苏⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯103．3芯片细胞培养⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯113．4细胞诱导处理⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1l

5、3．5芯片检测F一激动蛋白、皮层肌动蛋白的表达⋯免疫荧光细胞化学⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯113．6侵袭性伪足形成的检测⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯123．7图像及统计学分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯··⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·12(三)结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯121．微流控芯片的构建及效能验证⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯122．微流控芯片的细胞培养⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯133．微流控芯片的侵袭检测⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯14(四)讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯14(五)结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

6、17(六)参考文献⋯0Q8IIDOa⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯18三、综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯22(一)综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯22(二)参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯29四、附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯33五、攻读学位期间发表文章情况⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯37六、致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯38大连医科大学硕士学位论文微流控芯片三维细胞培养模式下肺癌细胞侵袭性伪足形成及转移研究硕士生姓名：王珊珊指导教师：王琪教授指导小组：王琪教授专

7、业名称：内科学摘要目的：肺癌是我国最常见也是死亡率最高的恶性肿瘤之一，严重危害着人类的健康。尽管原发性肿瘤在治疗方面已经取得很大进步，复发和转移是肺癌患者死亡的重要原因。细胞突起的延伸是癌细胞侵袭和转移的第一步。细胞边缘的激动蛋白促使这些突起的形成。在侵袭过程中，侵袭性细胞利用一种称作侵袭性伪足的亚细胞结构穿过基底膜，这种亚细胞结构具有破坏细胞基质的活性。微流控芯片，以其集成度高、成本低、体积小、灵敏度高、试剂消耗少、检测时间短等优势，被公认为是本世纪一项重要的科学技术。其微通道尺寸和多维网络形成的相对