基于微流控芯片技术的人非小细胞肺癌原代细胞培养及三维模式下的药敏检测和个体化治疗研究

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1、中图分类号密级基于微流控芯片技术的人非小细胞肺癌原代细胞培养及三维模式下的药敏检测和个体化治疗研究TheDrugSensitivityTestontheprimarynon—smallcelllungcancercellsforindividualizedtreatmentbasedonmicrofluidicchipwiththree—dimensionalculturemode计：学位论文：33页表插格：2个图：3幅指导教师：王琪教授申请学位级别：硕士学位高阳辉学科(专业)：内科学培养单位：大连医科大学附属第

2、二医院完成时间：二O一三年四月答辩委员会主席：独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得大连医科大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：高塑聋签字日期：址年上月点日关于学位论文使用授权的说明本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有

3、关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权大连医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本学位论文属于(请在以下相应方框内打“4”)：1．保密口，在一年解密后适用本授权书。2．不保密曰。作者繇禹佃许噍训>年5月5日导师签名：日期：讼f弓年5月5日目录一、摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1(一)中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1(二)英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3二、正文⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5(一)前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5(一)日IJ舌⋯⋯”一⋯””“”⋯“⋯”⋯”⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一⋯‘5(二)材料和方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯61．材料⋯··⋯⋯⋯⋯···⋯⋯⋯⋯·⋯·⋯⋯⋯··⋯⋯⋯⋯“⋯·61．1肺癌组织标本⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯61．2主要试剂和耗材⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯7l。3主要仪器⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯82．方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯

5、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯82．1实验准备⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯82．2实验步骤⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯9(三)结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯121．人NSCLC细胞原代培养⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯121．1原代细胞形态学表现及生长状况⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯131．2人细胞角蛋白．19及癌胚抗原CEA的表达⋯⋯⋯⋯132．微流控芯片药敏检测⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯13(四)讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯15(五)结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

6、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯19(六)参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯20三、综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯DOOIIDID⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯23(一)综述正文⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯23(二)参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯8DODD⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯28四、攻读学位期间发表文章情况⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯32五、致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯33大连医科大学硕士学位论文基于微流控芯片技术的人非小细胞肺癌原代细胞培养及三维模式下的药敏检测和个体化治疗研究硕

7、士生姓名：高阳辉指导教师：王琪教授指导小组：王琪教授专业名称：内科学摘要目的：肺癌是我国最常见也是死亡率最高的恶性肿瘤之一。其中，80％的肺癌是非小细胞肺癌(Nonesmallcelllungcancer，NSCLC)。近年来非吸烟人群妇女中肺腺癌及细支气管肺泡癌发病率的升高，使得NSCLC的诊断和治疗成为临床工作的重要任务和责任。化疗在晚期NSCLC综合治疗中占非常重要的地位。而准确的化疗药物敏感性检测是制定个体化治疗方案的前提。微流控芯片技术，以其体积小、标本消耗少、反应速度快、高通量及集成化等优势，被公认为

8、是本世纪一项重要的科学技术。该技术通过灌注凝胶可进行三维培养模式下细胞培养，并通过注射泵连续供给营养物质，更好地模拟体内肿瘤微环境。本实验旨在应用微流控芯片技术建立高效、稳定的人NSCLC原代培养方法，在三维细胞培养模式下对人NSCLC原代细胞进行药敏检测和个体化治疗研究，预测患者对化疗药物的敏感性，为临床规范化个体治疗提供依据。方法：8例手术标本均取自经病理确诊为NSC