线虫肠细胞中clathrin非依赖性的htac胞吞及后转运研究

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1、分类号学号M201171522学校代码10487密级硕士学位论文线虫肠细胞中Clathrin非依赖性的hTAC胞吞及后转运研究学位申请人：颜栋学科专业：生物化学与分子生物学指导教师：张蓉颖副教授答辩日期：2014年1月15日万方数据AThesisSubmittedinPartialFulfillmentoftheRequirementsfortheDegreefortheMasterofEngineeringMechanismsofendocytosisandpostendocytictraffickingofhTAC,aclathrin-independentca

2、rgomolecule,inC.elegansintestineCandidate:YanDongMajor:BiochemistryandMolecularBiologySupervisor:Assoc.Prof.ZhangRongyingHuazhongUniversityofScience&TechnologyWuhan430074,P.R.ChinaJan,2014万方数据独创性声明本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除文中已经标明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果。对本文

3、的研究做出贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：日期：年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权华中科技大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密□，在年解密后适用本授权书。本论文属于不保密□。（请在以上方框内打“√”）学位论文作者签名：指导教师签名：日期：年月日日期：年月日万方数据华中科技

4、大学硕士学位论文摘要细胞自身合成的蛋白等物质并不足维持细胞完整的生命活动，还需要从胞外环境中吸收其他的营养成分加以补充。但是，很多营养成分不能直接穿过质膜到达目的地，需要借助胞吞和囊泡运输将其运输到指定的目的靶位置。胞吞的种类多样，根据囊泡形成的分子基础可以将胞饮分为网格蛋白依赖的胞吞、巨胞饮、小窝介导的胞吞，以及网格蛋白和小窝不依赖的胞吞等类型。网格蛋白非依赖型胞吞途径（clathrin-independentendocytosis，CIE）作为胞吞作用中的重要一类，与网格蛋白依赖型胞吞途径（clathrin-dependentendocytosis，CDE）相比

5、，目前研究的还不是特别清楚。基于此，本文的主要工作内容是：以整合了CDE内吞模型分子hTfR-GFP和CIE内吞模型分子hTAC-GFP的秀丽隐杆线虫为模型，运用RNA干扰、杂交、质粒注射和基因转化等方法，比较研究clathrin、dynamin、Rab-5等与囊泡形成和转运相关性较大的几种重要调控蛋白在hTfR和hTAC分别示踪的CDE和CIE两种类型胞吞转运途径中调控功能的差异。我们分别在囊泡形成、脱落、早期转运过程、循环回收过程四个阶段，来阐明hTAC别示踪的CIE型胞吞转运过程中的部分分子调控机制，以及CDE和CIE两种胞吞囊泡转运途径的差异。通过上述实验，

6、我们在线虫模型上发现了clathrin和dynamin不参与调控CIE型胞吞小泡的形成和脱落，与之相反，Rab-5蛋白在其胞吞后的转运过程中发挥了重要作用，从而证明了CDE和CIE两种不同类型的胞吞分别以不同的调控机制形成胞吞小泡和使小泡脱落，并通过不同的路径进行早期转运，在早期内含体汇合分选，最后经循环途径将受体回收到质膜。关键词：线虫胞吞膜转运clathrin依赖clathirn不依赖I万方数据华中科技大学硕士学位论文AbstractTheuptakeofSomenutrientsfromextracellularenvironmentisessentialfo

7、rtheactivitiesofcells.Endocytosisandpostendocytictraffickingareabsolutelynecessaryforuptakeofthosenutrientsthatthosenutrientscannotpassthroughthecellmembranedirectly.Endocytosiscanbeclassifiedintoclathrin-dependentendocytosis,macropinocytosis,caveolar-dependentendocytosisandclathrin-