遹肺饮及其拆方对急性肺损伤后肺纤维化大鼠模型smad23表达影响研究

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1、河北医科大学学位论文使用授权及知识产权归属承诺本学位论文在导师(或指导小组)的指导下，由本人独立完成。本学位论文研究所获得的研究成果，其知识产权归河北医科大学所有。河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表与学位论文主要内容相关的论文，第一署名为单位河北医科大学，试验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。否则，承担相应法律责任。研究生签名：绷聊签章多彳匙级学院河北医科大学研究生学位论文独创性声明本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特别加以标注和致谢等内容外，文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果，指导教

2、师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写，文责自负。研究生签名：导师签章：≥萼多良叫争年多月；日目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．1英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．3研究论文适肺饮及其拆方对急性肺损伤后肺纤维化大模型Smad2／3表达影响研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．6—】L—jL·日IJ舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯6材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯7结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。13附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．17附表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．25讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．27参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．34综述肺纤维化中医药研究新进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．38致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．46个人简历⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯47中文摘要适肺饮及其拆方对急性肺损伤后肺纤维化大鼠模型

4、Smad2／3表达影响研究摘要目的：基于急性肺损伤后肺纤维化临床和实验研究，结合“肺气主降，肺体喜润”的生理特性，提出该病以肺之气阴两虚为本，血瘀为标的观点。通过实验观察通肺饮及其拆方对急性肺损伤后肺纤维化大鼠模型Smad2／3表达的影响，依据“以方测证”理论，揭示及完善急性肺损伤后肺纤维化的病机变化，为制定急性肺损伤后肺纤维化规范的中医辨证分型标准、疗效评定体系准确量化及选方用药标准提供建议，以便客观地评定效果。方法：实验采用博莱霉素．A5(BLM．A5)气管滴注法诱发急性肺损伤(ALI)后特发性肺纤维化(IPF)SD大鼠模型。108只大鼠随机分为对照组、模型

5、组、补气通络组、养阴通络组、祛瘀通络组、通肺饮组。对照组及模型组均灌服生理盐水10ml／kg，补气通络组灌服补气通络方混悬液，5．2eCkg体重；养阴通络组灌服养阴通络方混悬液，5．19／kg体重；祛瘀通络组灌服祛瘀通络方混悬液，5．3eCkg体重；遥肺饮组灌服通肺饮方混悬液12．4g／kg体重；各组均每日1次灌胃。通过每日观察大鼠的体重、饮食情况、精神状态、反应情况、外观表征和粪便情况等进行观测，确定急性肺损伤后肺纤维化大鼠模型建立成功。造模后分别在第7天、第14天、第28天三个时间段将6组大鼠各随机抓取6只进行麻醉，股动脉取血；右下肺组织置于4％中性甲醛固定

6、，做石蜡切片，行HE与Masson染色、免疫组化染色；剩余组织液氮速冻，．70℃保存备用，进行Westem．blot。结果：lHE染色结果显示：空白对照组肺组织结构清晰，肺泡腔透亮，肺泡壁未见增厚，肺泡上皮细胞结构完整，肺间质未见胶原沉积。模型组随着时间的延长，其肺泡炎和肺泡纤维化程度明显升高，7天时部分肺泡和毛细血管狭窄甚闭合，致肺组织实性改变，肺泡腔可见大量活化巨噬细胞，中性粒细胞、淋巴细胞少见，肺间质内则出现大量的巨噬细胞及淋巴细胞中文摘要炎性浸润；14天时肺泡炎持续，炎性细胞浸润亦较明显，部分肺泡结构消失，成纤维细胞增多并可见纤维组织增生，少量胶原沉积；

7、28天时肺泡结构萎陷，成纤维细胞大量增生，纤维组织占据肺泡间隔及部分肺泡腔呈条索样瘢痕改变，斑片状分布。2Masson染色结果显示：空白对照组在气管及血管壁周围可见少量蓝色的胶原纤维沉积。模型组第7天时肺泡间隔及间质内有成纤维细胞，多集中在血管、小及细小支气管周围，并可见少量蓝色胶原纤维沉积；第14天时肺泡间隔明显增宽，肺血管、气道壁、肺泡间隔及间质内胶原纤维沉积明显增加；第28天时肺间质沉积大片状或条索状的胶原纤维，肺泡融合及实变，典型的肺纤维化改变。3免疫组化及Western．blot结果显示：肺组织中Smad2／3和TGF．13在第14和28天均持续高表达

8、，且第14天表达最高。4