输卵管上皮细胞和卵泡液对人精子顶体反应的影响

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1、暨南大学硕士学位论文输卵管上皮细胞和卵泡液对人精子顶体反应的影响姓名：任琳申请学位级别：硕士专业：发育生物学指导教师：朱伟杰20000101摘要目的通过检测与人输卵管上皮细胞(HOEC)共培养的人精子在不同时间的顶体反应(AR)率，探讨精子在输卵管内AR过程的特点，分析HOEC对精子AR的影响和可能机制。通过检测经过不同时间体外获能培养的精子与卵泡液(FF)共育后的AR率，探讨FF对精子AR的影响作用和可能机制。方法1、精子未经获能培养和经不同时间获能培养后与20％FF共育，在0hr，3hr，6hr，9llr检测精子的AR率。

2、2、精子与HOEC共培养，在011r，3hr，611r，9llr，2411r检测精于的AR率。同时检测与HOEC条件培养液共育的精子的AR率。检测9hr培养时间内精予的存活率。3、精子在与HOEC共培养后3llr和6llr，加入20％FF作用3llr，检测其AR率。以上实验分别设比较组和对照组。结果1、20％FF作用于未获能精子3llr，其AR率为5．46％±1．8％。作用于经过3hr获能培养的精子3llr，AR率达20．44％±5．9％。2、符合WHO正常精液标准的精液的精子在HOEC共培养系统的自发性AR率在24hr培养时

3、间里从352％±1．1％～k升至13．05％±23％。6}1r以后的AR率显著性低于对照组中的精子(P

4、系统中的自发性AR率的变化主要出现两种不同特征。分别为：(1)快反应：精子在6hr的AR率达最大值29．56％±7．2％。(2)慢反应且AR率低：精子在24hr培养过程中，最大自发性AR率

5、诱发性AR率都小于10％。结论l、FF不能直接诱导未经获能培养的精子发生AR，但能在3hr的作用时间里诱导经获能培养的精子发生诱发性AR。2、HOEC有助于保持精子活力，促进精子的获能，同时有维持精子顶体完整的作用。3、不同质量精液的精子在HOEC共培养系统中的自发性和诱发性AR的动态过程有其不同特征。4、HOEC能改善一部分低质量精液精子的发生诱发性AR的功能。关键词：人精子；顶体反应；卵泡液；输卵管上皮细胞：共培养2ABSTRACTPurposeThepresentstudywasdesignedtopursuetheki

6、neticcharacteristicsofacrosomereaction(AR)ofsperminthefallopiantubeinvivo，toevaluatetheeffectofhumanoviductalepithelialcelI(HOEC)ontheARcapacityofspermandthepossiblemechanismsthroughtheapplicationofcoculturesystemwithHOECinvitro．Thesecondpurposeofthisstudywastoasses

7、stheinfluenceoffollicularfiuid(FF)ontheARcapacityofspermthroughobservingARrateofspermpreincubatedfordifferenttimetogetcapacitation．Methods1．Thespermnon-preincubatedandthespermpreincubatedfordifferenttimewereincubatedintheHam’sF10mediumwith20％FF．TheARratewereasseseda

8、t0，3，6，9hours．2．Thespermwereco-culturedwithHOECandco-incubatedwithconditionedmediumofHOEC．TheARratewereassessedat0,3，6，9，24hours．Theviabil