苍耳子不同部位毒性评价及成分分析

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1、湖北中医药大学学位论文原创性声明本人声明：所呈交的学位论文是在导师的指导下进行的研究工作及取得的研究成果。除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，本论文不包含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得湖北中医药大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。对本文的研究做出贡献的个人和集体，均已在论文中作了明确的说明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学冀论，储叛立噼伽I妒年皇月弦日。关于学位论文使用授权的声明本人完全了解湖北中医药大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公

2、布学位论文的全部或部份内容，可以采用复印、缩印或其他手段保留学位论文；学校可以根据国家或湖北省有关部门的规定送交学位论文。同意《中国优秀博硕士论文全文数据库出版章程》的内容。同意授权中国科学技术信息研究所将本人学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》。(保密论文在解密后遵守此规定)论文作者签名：立品葺．导师签名：丑芡芝洳叼年j1如日目录摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．IABSTRACT．．．．．．。．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．II第一章苍耳子不同部位的体外毒性筛选⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．31

3、仪器与材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯32方法与结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯53讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯8第二章苍耳子炒制前后毒性部位急性毒性实验研究⋯⋯⋯⋯91实验材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．92方法与结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．113讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．19第三章苍耳子不同部位有效成分及毒性成分的含量测定⋯⋯．21第一节苍耳子不同部位中绿原酸和1，5一二咖啡酰⋯⋯⋯．．21喹宁酸的含量测定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．211仪器与试药⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．212方法与结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．223讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．30第二节苍耳子不同部位中羧基苍术苷和苍术苷的含量测定⋯．311仪器与试药⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．312方法与结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．323讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．40第四章苍耳子不同部位指纹图谱分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．411仪器与试药⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．412实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．423指纹图谱及技术参数⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯474苍耳子指纹图谱结果分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．525苍耳子不同部位指纹图谱的初步比较研究⋯⋯⋯⋯

5、⋯576讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．58附录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．61苍耳子化学成分及临床药理毒性研究的文献综述⋯⋯⋯⋯．．61参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．7o发表文章⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．77致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．78摘要苍耳子为菊科植物苍耳)anthiu叨sibiricumPatr．干燥成熟带总苞的果实，具有散风寒，通鼻窍，祛风湿的功能。在我国资源丰富，药用历史悠久，为传统的鼻科良药。苍耳子生品有毒，药用其炮制品。药理实验和临床应用均表明，苍耳子经过炮制后，毒性明显降低。但

6、苍耳子的毒性部位，尚不明确。因此本论文采用现代细胞培养方法体外筛选苍耳子毒性部位，针对毒性部位用动物实验比较苍耳子炒制前后毒性部位的毒性大小及对主要脏器的损伤。采用HPLC法分析苍耳子不同部位中有效成分及毒性成分的含量差异，分别建立了苍耳子不同部位的指纹图谱并进行了比较研究。主要有以下内容：1．苍耳子不同提取部位的体外毒性筛选研究采用MTT细胞培养法体外快速筛选炒制前后苍耳子的毒性部位。炒制前后苍耳子水提液，分别经过石油醚、氯仿萃取，萃取后的水溶液1／3留样，2／3水溶液过D-101大孔树脂，分别收集水洗脱部位、50％L醇洗脱部位、90％乙

7、醇洗脱部位，将此六个部位样品与原留样样品同时做体外细胞实验，以细胞生长抑制率为判断指标。细胞生长抑制率高，表明其细胞毒性大。结果显示：以苍耳子50％乙醇洗脱部位抑制率最高，炒苍耳子50％乙醇洗脱部位抑制率其次。2．苍耳子炒制前后毒性部位急性毒性实验研究采用小鼠急性毒性实验比较苍耳子炒制前后毒性部位毒性大小。通过检测小鼠肝、肾功能生化指标及病理切片，比较炒制前后苍耳子毒性的大小及主要脏器的损伤，阐释了苍耳子炮制降毒机制。3．苍耳子不同部位有效成分及毒性成分的含量测定采用高效液相色谱法，分别对苍耳子、去刺苍耳子及苍耳子刺中主要活性成分绿原酸、1

8、，5一二咖啡酰喹宁酸及主要毒性成分羧基苍术苷、苍术苷的含量进行比较研究，阐释了苍耳子炮制去刺的科学依据。4．苍耳子不同部位指纹图谱分析研究采用HPLC法建立了苍耳子刺、去刺苍耳子