毒性成分含量优选苍耳子的炮制工艺_韩燕全.pdf

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1、第39卷第7期Vol.39，Issue72014年4月April，2014UPLC指纹图谱技术结合毒性成分含量优选苍耳子的炮制工艺1211123*韩燕全，洪燕，夏伦祝，高家荣，汪永忠，孙艳华，易进海(1.安徽中医药大学第一附属医院，国家中医药管理局中药制剂三级实验室，安徽合肥230038;2.安徽中医药大学，安徽合肥230031;3.四川省中医药科学院，四川成都610041)［摘要］通过16个不同工艺炮制样品水提取部位的UPLC指纹图谱和毒性成分含量比较，优选苍耳子炒制的最佳工艺。UPLC指纹图谱色谱条件为AcquityBEHC18色谱柱(2.1mm×100mm，1.7μm);流动相乙腈-

2、0.1%磷酸溶液，梯度洗脱;流速－10.25mL·min;检测波长327nm。毒性成分含量测定的色谱条件为AgilentTC-C18色谱柱(4.6mm×250mm，5μm);流动相－1－1甲醇-0.01mol·L磷酸二氢钠溶液(35∶65);流速1.0mL·min;检测波长203nm。实验建立了16个不同工艺样品的UPLC指纹图谱，并对其分别采用《中药色谱指纹图谱相似度评价软件》、SPSS16.0软件和SIMCA13.0软件进行相似度分析、聚类分析和主成分分析;16个炮制样品相似度均大于0.97;聚类分析表明炮制样品可大致聚成4类;主成分分析结果认为影响最明显的3个成分分别是绿原酸、3，5

3、-二咖啡酰奎宁酸和咖啡酸;毒性成分含量测定结果表明炮制后毒性成分明显降低，炮制可起到减毒作用;该实验方法可用于优选苍耳子的炮制工艺。［关键词］指纹图谱;毒性成分;苍耳子;炮制工艺苍耳子是临床常用中药之一，其名苍耳子最早结合毒性成分羧基苍术苷和苍术苷的含量变化为指出现于唐代医药学家孙思邈所著《千金·食治》一标，优选其炮制工艺，为其炮制工艺和减毒增效的机书，但在我国最早的药物学专著《神农本草经》一书制研究提供了实验证据。［1］中就以葈耳实之名收载，并列为中品。《中国药1材料典》2010年版项下收载其来源于菊科植物苍耳Xau-WatersAcquityUPLCH-Class超高效液相色谱thiu

4、msibiricumPatr.的干燥成熟带总苞的果实，规系统，配有四元超高压溶剂系统、自动进样恒温样本［2］定其常用量3～10g，并应炮制后入药。苍耳子生管理器、柱温箱、PDA检测器和Empower2色谱工品有毒，如炮制不当、未经炮制使用或用量过大(单作站(美国Waters公司);KQ3200DB型超声清洗器［3］次剂量超过30g)均可引起中毒，甚至死亡。现(江苏昆山超声仪器有限公司);XFB-200型高速中代研究表明，苍耳子所含化学成分较多，已明确的有药粉碎机(吉首市中州制药机械厂);BP211D型电［4］效成分有绿原酸、咖啡酸等多种酚酸类，毒性成子天平(德国Sartorius公司)，Y

5、M-902型高精密度分有水溶性苷类包括羧基苍术苷、苍术苷及其衍生防泼水PH计(姜堰市樱明仪器仪表有限公司)。［5］物等。课题组前期对苍耳子的醇提部位指纹图对照品绿原酸(110753-200413)，咖啡酸谱和炮制前后酚酸类成分含量变化已进行了系统比(110885-200102)和阿魏酸(110773-201313)购自中较。由于苍耳子临床用药多以炮制品水煎入药，故国食品药品检定研究院;1，3-二咖啡酰奎宁酸本实验以苍耳子水提部位指纹图谱的多方法评价，(11042905)，3，4-二咖啡酰奎宁酸(12041114)，3，5-二咖啡酰奎宁酸(12101101)，4，5-二咖啡酰奎［收稿日期］2

6、013-11-01宁酸(11081803)，隐绿原酸(11112203)和新绿原酸［基金项目］国家中医药重点学科临床中药学建设项目(国中医药(11112202)均购自成都曼斯特化工有限公司;羧基人教发［2012］32号)113苍术苷和苍术苷对照品自制，经H-NMＲ，C-NMＲ，*［通信作者］易进海，研究员，研究方向为中药化学成分与质量标MS，IＲ和UV等光谱检测确认其结构;按归一化法准，E-mail:yijinhai@yahoo.com.cn［作者简介］韩燕全，副主任中药师，研究方向为中药炮制与质量测得其纯度均≥98%。苍耳子药材购于安徽省药材控制，E-mail:hyquan2003@16

7、3.com公司，产地为河南，经安徽中医药大学药学部李立华·1248·第39卷第7期Vol.39，Issue72014年4月April，2014主任中药师鉴定为菊科植物苍耳X.sibiricumPart.min，15.0%～20.0%A;8.5～14min，20.0%～的成熟带苞果实。色谱纯甲醇、乙腈(SIGMA公25.0%A;14～17min，25.0%～35.0%A;17～20－1司);甲醇、磷酸、磷酸二氢钠等试剂均为