黄连水提液抑制蓝藻并增强鲢鱼抗微囊藻毒素的能力

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1、汕头大学硕士学位论文硕士学位论文题目：黄连水提液抑制蓝藻并增强鲢鱼抗微囊藻毒素的能力英文题目：CoptischinensisextractsinhibitMicrocystisaeruginosaandimprovetheviabilityofsilvercarpsincyanobacteriawater姓名余飞学号11108069导师姓名谢丽玲职称副教授专业生物化学与分子生物学入学日期2011年9月答辩日期2014年6月万方数据汕头大学硕士学位论文学位论文原创性声明本论文是我个人在导师指导下进行的工作研究及取得的研究成果。

2、论文中除了特别加以标注和致谢的地方外，不包含其他人或其它机构已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集体，均已在论文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律责任由本人承担。作者签名：日期：年月日学位论文使用授权声明本人授权汕头大学保存本学位论文的电子和纸质文档，允许论文被查阅和借阅；学校可将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其它复制手段保存和汇编论文；学校可以向国家有关部门或机构送交论文并授权其保存、借阅或上网公布本学位论文的全部或部分内容。对于保密的论文，按照保密的有

3、关规定和程序处理。本论文属于：保密（），在年内解密后适用本授权声明。不保密（）。（请在以上括号内打“√”）作者签名：导师签名：日期：年月日日期：年月日万方数据汕头大学硕士学位论文摘要微囊藻水华暴发抑制其他藻类和水生植物的光合作用，释放藻毒素及硫化氢等有毒物质，直接危害水生动物。水生生物死亡后被微生物分解，又会消耗大量的溶解氧，造成鱼类病害。到次年气温升高，微囊藻会再次爆发，使水体环境进入恶性循环。本论文研究了鬼针草、黄连、夹竹桃等中草药对铜绿微囊藻(Microcystisaeruginosa)的抑制作用，所筛选的9种中草药抑

4、制作用由大到小依次是黄连、夹竹桃、车前草、蛇竹草、火炭母，蛇舌草、白饭草、艾叶和鬼针草不具有抑制铜绿微囊藻的作用。深入研究黄连水提液对铜绿微囊藻的抑制作用，黄连处理组的藻液蛋白含量呈上升趋势，叶绿素a和糖类呈下降趋势；空白组的蛋白质、糖类和叶绿素a都上升。黄连处理组的藻细胞外蛋白含量在72h内剧烈上升，72h后快速下降，藻细胞外糖类缓慢下降；空白组的藻细胞外蛋白基本维持稳定，糖类含量缓慢下降。用高效液相色谱法检测微囊藻毒素MC-LR，发现黄连水提取液处理组的铜绿微囊藻细胞内MC-LR含量120h后降低了82.4%；空白组的铜

5、绿微囊藻细胞内和细胞外MC-LR含量都随抑制时间延长而升高。黄连可能首先影响了铜绿微囊藻的光合作用，进而抑制了蛋白质和糖类合成，最终导致其死亡。黄连水提液作为饲料添加剂以5mg黄连/g基础饲料剂量喂养白鲢鱼(Hypophthalmichthysmolitrix)，14d后药物组体重增重率低于对照组；喂药组脂肪酶活力高于对照组，胃蛋白酶和淀粉酶活力低于对照组，差异不显著(P>0.05)。14d后将鱼放入藻液中，2h后取鲢鱼肠道检测，发现对照组和喂药组的脂肪酶活力升高，组内比较差异达到了极显著水平(P<0.01)；胃蛋白酶活力升

6、高，不存在显著性差异(P>0.05)。喂药组淀粉酶活力极显著降低(P<0.01)，对照组淀粉酶活力显著降低(P<0.05)。组间比较，喂药组胃蛋白酶活力低于对照组，脂肪酶和淀粉酶活力高于对照组，不存在显著性差异(P>0.05)。表明黄连作为鱼类饲料添加剂可以提高肠道脂肪酶活力，降低胃蛋白酶活力，能保持鲢鱼在微藻水体生存期间的淀粉酶活力。还原型谷胱甘肽GSH是鲢鱼肝脏中的主要的解毒物质，其与微囊藻毒素结合的过程由可溶性谷胱甘肽S-转移酶(SolubleglutathioneS-transferase,sGST)催I万方数据汕头

7、大学硕士学位论文化。本实验发现在正常饲养条件下，药物组鲢鱼肝脏GSH和sGST含量均高于药物组，差异不显著(P>0.05)。将鲢鱼放入铜绿微囊藻水体中，24h后取鲢鱼肝脏检测发现对照组GSH、sGST活力降低(P>0.05)，喂药组GSH、sGST活力升高(P<0.01)，且高于对照组(P<0.01)。表明黄连作为鱼类饲料添加剂增强了鲢鱼对微囊藻毒素的解毒能力，提高了在藻液中的生存能力。关键词：黄连；铜绿微囊藻；MC-LR；消化酶；GSH；sGSTII万方数据汕头大学硕士学位论文AbstractCyanobacteria(b

8、lue-greenalgae)bloomsinhibitphotosynthesisofotheralgaesandaquaticplants,releasemicrocystinandH2S,whicharethreatstoaquaticanimalandhuman.Onceaquat