胶体金免疫层析法联合检测ev71和ca16igm的研究

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1、单位代码：10472学号：1112002中图分类号：R446．61密级：公开拓浙霸擎纨硕士学位论文胶体金免疫层析法联合检测EV71和CAl6IgM的研究ColloidalGoldImmunochromatographyAssayforCombinedDetectionofEnterovirua71andCoxsackieVirusA16IgM研究生姓名型!园圄指导教师王云蕉塾援年级二。一一论文提交日期三Q二四生四旦ColloidalGoldImmunochromatographyAssayforCom

2、binedDetectionofEnterovirua71andCoxsackieVirlA16VirusAThesisSubmittedfortheDegreeofMasterCandidate：SunYuanyuanSupervisor：Prof．WangYunlongSchoolofLaboratoryMedicineXinxiangMedicalUniversity新乡医学院学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的

3、内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的成果作品。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。作者签名：三，】、}司l习日期：如f≯年4月易日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权新乡医学院可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文

4、。本学位论文属于(请在以下相应方框内打“√”)：1．保密口，在一年解密后适用本授权书。2．不保密西作者签名：导师签名：孙因因霭衍日期：2D～年4,n)；日日期：)口f炸妒月劣日目录摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．(1)Abstract⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．(3)第一部分前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．(6)第二部分材料和方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

5、．(9)第三部分实验结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯(32)第四部分讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯(45)第五部分小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯(48)参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯(49)文献综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯(56)附录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯(63)攻读学位期间发表文章情况⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

6、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯(64)致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．(65)个人简历⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯(66)新乡医学院硕士学位论文胶体金免疫层析法联合检测EV71和CAl6IgM的研究摘要簦旦罔jj忌手足口病(Handfootandmomhdisease，HFMD)的主要致病原为肠道病毒7l型(Enterovirus71，EV71)和柯萨奇病毒A组16型(CoxsackieA16，CAl6o近年来，

7、HFMD发病率在全球呈逐年上升趋势，引起全球特别是我国政府和医疗体系的高度关注。但临床缺乏早期快速简便高灵敏度的诊断方法，不能及时有效诊断疾病，常造成重大疫情，严重影响了人民健康和社会稳定。所以，寻找简便快速的床旁快速检测是目前手足口病防控研究的热点与难点。目的建立胶体金免疫层析捕获法联合检测EV71和CAl6IgM试纸条。方法1．EV71一VPl重组蛋白的表达优化：将pET-41b(+)一VPl转入BL21(DE3)@，制备重组菌。初步诱导表达后，经SDS．PAGE和Westernblot检测，当结

8、果与预期结果一致时，采用单因素变量法分别进行诱导时问、诱导剂浓度的优化，选择最适条件进行诱导表达。2．EV71一VPl重组蛋白的纯化：表达产物通过StreamlineDEAE和StreamlineChelating进行纯化获得高纯度蛋白。3．试纸条的初步制备与检测：以实验室同类试纸条制备方法制备试纸条并检测。试纸条以EV71一VPl和CAl6一VPl抗原分别作检测线1、检测线2，以羊抗鼠IgG多克隆抗体作质控线，胶体金标记鼠抗人IgM“链抗体。4．工艺优