胞外泛素对treg细胞免疫抑制活性的影响

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1、万方数据学校代码；10246学号：11211220001橇堡大学硕士学位论文胞外泛素对Treg细胞免疫抑制活性的影响TheEffectofExtracellularUbiquitinonImmunosuppressionofTregCells系：华山医院业：内科学名：曹日针指导教师：夏荣教授完成日期：2014年4月20日院专姓万方数据复旦大学硕士学位论文缩略语注释英文简称英文全称中文译名TIUMTransfusion-relatedimmunomodulatory输血相关免疫调节ABTAllogeneicbloodtransfusion同种异体输血PBMNCPeripheralbloodmo

2、nonuclearcells人外周单个核细胞UbUbiquitin泛素TregCD4+CD25+FoxP3+regulationTcell调节性T细胞TefrCD4+CD25．effectiveTceU效应性T细胞羧基荧光素二醋酸盐琥珀CFSECarboxyfluoresceinsuccinimidylaminoester酰亚胺酯ThpThelpercellsT辅助细胞FoxP3Forkheadboxp3叉状螺旋转录因子TGFTransforminggrowthfactor转化生长因子FGFRFibroblastgrowthfactorreceptor成纤维细胞生长因子受体IL．2Inter

3、leukin．2自细胞介素．2GPCRGprotein-coupledreceptorG蛋白偶联受体LPSLipopolysaccharides脂多糖TCRTcellreceptorT细胞受体GVHDGraft．．versus．．hostdisease移植物抗宿主病GPCPG·-protein-·coupledreceptorsG蛋白偶联受体呲5一删6一眦0㈣5一Ⅲ6一删8一眦2一眦Y一万方数据目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．5日I

4、J茜⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯7结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯23讨{仑⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯31参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．36小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．43综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯44在读期间发表论文⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．54致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯55

5、万方数据复旦大学硕士学位论文中文摘要胞外泛素对Treg细胞免疫抑制功能的影响中文摘要背景与目的CD4+CD25+FoxP3+调节性T细胞(Treg细胞)在维持机体免疫稳态，特别是免疫耐受中具有重要作用，其作用的发挥主要是通过调控CD4+CD25’效应性T细胞(Teff细胞)的功能来实现的。Treg细胞的数量和活性与自身免疫性疾病密切相关，因此如何有效调节Treg细胞数量和活性已经成为研究热点。我们前期研究发现泛素在血液制剂的贮存过程中浓度明显升高，且与保存时间正相关。而泛素受体CXCR4在Treg细胞表面高表达，与Treg细胞的趋化迁移、免疫耐受的诱导以及抗肿瘤免疫作用密切相关，本研究探讨泛

6、素是否通过结合Treg细胞表面受体CXCR4进而影响Treg细胞的免疫抑制活性。方法将正常人外周血的单个核细胞(PBMCs)与不同浓度N末端标记FITC荧光的泛素37。C共孵育1小时，流式细胞仪初步分析泛素与人PBMCs中Treg细胞的结合能力；用磁珠分选的Treg细胞与N末端标记FITC荧光的泛素37℃共孵育1小时，流式细胞仪再次验证胞外泛素与Treg细胞的结合率，并得出两者结合的最适泛素浓度：运用Transwell方法分析不同浓度泛素(0、0．2、0．4、0．6和0．8洲)对人PBMCs中Treg细胞趋化迁移能力的影响；最后胞外泛素对Treg细胞发挥免疫抑制功能的影响通过Treg细胞与T

7、eff细胞共培养后检测：CFSE标记的Te行细胞与Treg细胞按照1：O、1：1、1：2和1：3的比例共培养，37。C培养72小时，流式细胞仪检测Treg细胞对Teff细胞增殖的影响；CFSE标记的Teff细胞与Treg细胞按照1：1的比例共培养，实验组加入最适浓度泛素，对照组不加泛素，37。C孵育72小时，流式细胞仪检测泛素对Treg细胞发挥免疫抑制功能的影响；胞外泛素对人外周血Treg细胞凋亡的作用：Tr