甘蓝型油菜不同硼效率品种bnnip6;1s基因的克隆及其表达研究

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1、分类号华中农业大学硕士学位论文密级：甘蓝型油菜不同硼效率品种BnNIP6；ls基因的克隆及其表达研究CloningandExpressionAnalysisofBnNIP6；IsofBrassicanapuswithDifferentBoronEfficiency硕士研究生：学号：指导教师：指导小组：专业：植物营养学获得学位名称：农学硕士常新菊2011303110061石磊教授徐芳森教授石磊教授蔡红梅副教授丁广大博士研究方向：植物营养遗传获得学位时问：2014年6月华中农业大学资源与环境学院二。一四年六

2、月华中农业大学学位论文独创性声明及使用授权书学位论文是否如需保密，解密时间年月日否保密独创性声明J岬必删舢删㈣删㈣Y256560石本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究I作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得华中农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料，指导教师对此进行了审定。与我--I司_T．作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中做了明确的说明，并表示了研究生签名：咩施氟时间：uI叶年‘月，

3、葛日学位论文使用授权书本人完全了解华中农业大学关于保存、使用学位论文的规定，即学生必须按照学校要求提交学位论文的印刷本和电子版本：学校有权保存提交论文的印刷版和电子版，并提供目录检索和阅览服务，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。本人同意华中农业大学可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容，并授权中国科学技术信息研究所和北京万方数据股份有限公司将本人学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》．并进行信息服务(包括但不限于汇编、复制、发行、信息网络传播等)，同时本人保留

4、在其它媒体发表论文的权力。注：保密学位论文(即涉及技术秘密、商业秘密或申请专利等潜在需要提交保密的论文)在解密后适用于本授权书。学位论文作者签名：晕耘角导师签名：硫签名日期；铂l’，年6月坷日签名日期乏夕‘舻年占月髭芦本研究由国家自然科学基金项目(31172018)，教育部新世纪优秀人才项目(NCET．13．0809)和中央高校基本科研业务费专项资金资助项目(2014PY020)资助。甘蓝型油菜不同硼效率品种BnNIP6；Is基因的分离及其表达研究目录目录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

5、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯I摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．iAbstract⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯．．．．．．．．．．．⋯．．．．．．⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．⋯．．iii1前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．11．1文献综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯11．1．1我国土壤有效硼概况⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

6、⋯11．1．2油菜硼高效研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．11．1．3拟南芥和油菜等作物硼吸收和转运基因⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5I．2研究背景、内容和技术路线⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．101．2．1研究背景⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．101．2．2研究目标⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一101．2．3研究内容⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。101．2．4技术路线⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。lI2．甘蓝型油菜硼高、低效品

7、种中BnNIP6；rIs同源基因的克隆⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯122．1材料和方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．122．2．1芸墓科AtNIP6；I同源基因序列数据的获取⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．122．2．2芸薹科AtNIPCJ，同源基因序列数据的进化分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯．122．3甘蓝型油菜硼高、低效品种AtNIP6；1同源基因的克隆⋯⋯⋯⋯⋯⋯122．3．1基因组DNA的提取⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯】22-3．2引物设计及NIP6；ls同源基因(西棚P西Js)的PCR扩增⋯⋯122．3．

8、3琼脂糖凝胶电泳⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．132．3．4PCR产物目标片段回收⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。142．3．5高效感受态细胞的制作⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯～142．3．6DNA片段连接载体⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯152．3．7质粒转化大肠杆菌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。152．3．8阳性克隆的PCR鉴定及测序⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．162．2结果与分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯