肝细胞生长因子hgf诱导肝癌细胞hepg2离散与浸润机制的实验研究

《肝细胞生长因子hgf诱导肝癌细胞hepg2离散与浸润机制的实验研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、学位论文独创性声明本人郑重声明：l、坚持以“求实、创新”的科学精神从事研究工作。2、本论文是我个人在导师指导下进行的研究工作和取得的研究成果。3、本论文中除引文外，所有实验、数据和有关材料均是真实的。4、本论文中除引文和致谢的内容外，不包含其他人或其它机构已经发表或撰写过的研究成果。5、其他同志对本研究所做的贡献均已在论文中作了声明并表示了谢意。学位论文使用授权声明本人完全了解南京师范大学有关保留、使用学位论文的规定，学校有权保留学位论文并向国家主管部门或其指定机构送交论文的电子版和纸质版；有权将学位论文用于非赢利目的的少量复制并允许论文进入学校图书馆被查阅；有权将学位论文的内容编入有关数

2、据库进行检索；有权将学位论文的标题和摘要汇编出版。保密的学位论文在解密后适用本规定。作者签名：连差重日期：目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1ABSTRACT⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3第一章综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5第二章肝细胞生长因子HGF促进肝癌细胞HepG2离散与浸润⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯：!】【第三章肛catenin介导的Wnt信号通路的激活参与HGF诱导HepG2离散⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯31全文小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．48附录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯-⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯49致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯50硕士学位论文中文摘要肝细胞生长因子HGF诱导肝癌细胞HepG2离散与浸润机制的实验研究肿瘤细胞转移是肝癌病人治疗失败和死亡的主要原因。对肝癌治疗来说，防止癌的复发(或再发)与转移是其主要目标。肝细胞生长因子HGF是一种多功能的生长因子，与其受体c-Met结合可介导细胞的生长、迁移和形态建成等多项细胞学效应，大量研究表明HGF／c．Met信号异常与肿瘤的浸润和转移密切相关。我们在体外检测HGF对

4、肝癌细胞生长影响时，发现HGF明显促进肝癌细胞HepG2的离散和浸润。本文通过下调c-Met的表达考察了抑制HGF／c．Met信号通路对HGF诱导的HepG2离散、浸润的影响，并且考察了HGF刺激HepG2对两种与肿瘤浸润转移密切相关的粘附分子B—catenin、E．cadherin的影响，试图探求HGF诱导肝癌细胞HepG2离散与浸润的机制，以期找到新靶点来抑制HGF诱导的HepG2离散与浸润。结果如下：l、通过对细胞克隆扩散程度的定量分析发现用HGF刺激HepG248h后，HepG2的离散程度增加了2—3倍，Transwell小室法体外模拟浸润实验表明当HGF浓度为50．100ng／m

5、l时，HepG2在体外浸润能力增强了2—3倍。利用腺病毒介导的RNA干扰技术下调c-Met的表达可抑制HGF诱导的HepG2离散与浸润，具有潜在的用于治疗肝癌浸润与转移的价值。2、用免疫印迹方法分析发现，在HGF刺激HepG224h和48h后，E．cadherin的表达量下降，实时定量PCR检测显示，在HGF刺激HepG224h和48h后，E—cadherin的mRNA水平没有发生明显的变化，这提示E．cadhefin发生了降解。免疫细胞荧光染色显示，HGF刺激HepG230min后，B-catenin发生入核，并且通过免疫共沉淀发现此时13-catenin与E．cadherin结合减少；

6、HGF刺激HepG248h后，通过荧光素酶报告基因发现13一catenin的转录调节活性显著增强，而腺病毒AdATCF．4可抑制HGF诱导的HepG2细胞离散；当HGF刺激HepG212h和24h后，利用实时定量PCR检测到1]-catenin靶基因MMP一7转录的增强，这种转录硕士学位论文的增强可被AdzITCF-4所抑制。免疫印迹分析还显示腺病毒AdATCF．4可抑制HGF诱导的E—cadherin的降解。这些结果提示HGF刺激HepG2，使B-catenin入核，提高TCF／LEF的转录活性，进而增强MMP一7的转录，可能使E．cadherin发生降解。HGF诱导HepG2离散与13

7、-catenin入核，并提高TCF／LEF的转录活性有关。腺病毒AdATCF．4可抑制HGF诱导的HepG2离散，这为抑制HGF诱导HepG2离散提供一新靶点。关键词：肝细胞生长因子HGF；c—Met；离散；I]-catenin；E．cadherin2硕士学位论文ABSTRACTExperimentalstudiesonthemechanismofscatteringandinvasioninducedbyHGFinHe