连翘花和叶中清除自由基成分分析及其含量测定

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1、分类号：密级：连翘花和叶中清除自由基成分分析及其含量测定QualitativeandquantitativeanalysesofthemajorDloactivecompoundsonSCaVengln2Ireeranicalin●■·●l●n1●l●flowerandleavesofForsythiasuspensa学位申请人：张飞指导教师；崔同教授学科专业：农产品加工及贮藏工程学位类别：农学硕士授予单位：河北农业大学答辩日期：二。一一年六月四日独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特

2、别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得塑皇垦盛些蠢堂或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：多扶弘签字日期：力夕／／年∥月厂日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解塑兰垦盔些盘堂有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权塑皇垦盔些盘堂可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编

3、学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文作者签名：多次沮签字日期．沙／／年厂月7日学位论文作者毕业后去向：工作单位：通讯地址：一名：锄习签字日期：z,o／／年乡月电话：邮编：7日摘要㈣㈣㈣IIllllIII删11Illlrll㈣lrlJlY1897250。目前研究表明，肿瘤、衰老、以及心脑血管疾病等慢性疾病的发生机理均与体内自由基产生过多或清除自由基能力下降有着密切的关系。人们发现抗氧化剂可以清除体内过多的自由基。使用最多最广泛的大多为合成型抗氧化剂，由于合成抗氧化剂潜在的毒性和致癌作用等，逐渐受到人们的排斥。因此，从植物中寻找天然、

4、高效、低毒的抗氧化剂受到越来越广泛的关注而成为研究的热点。连翘(Forsythiasuspense)通常是以果实入药，具有清热解毒、消肿散结之功效。在我国的河北和陕西等地，连翘叶常被当茶饮用，并具有保健的功能。综合近年来对连翘属植物的研究结果得知，同属植物的叶子与果实的化学成分有很好的一致性。已有研究证实，连翘叶提取物有较好的抗氧化和降血脂作用。为了更好的开发利用天然资源，本实验对连翘花、叶清除自由基的成分进行了分析，并对其含量进行了测定，为连翘资源的综合开发利用提供科学依据。连翘花和连翘叶于2008年3—10月份采摘于河北医科大学校园内，经烘干，粉

5、碎，过筛，样品粉末脱脂后用60％甲醇超声波提取。采用DPPH法和ABTS法，通过与连翘中药相比较，评价了连翘花、叶清除自由基能力。并采用HPLC．DPPH离线法对连翘花、叶中的清除自由基成分进行了分析，利用与标准品的保留时间、紫外光谱以及高效液相．质谱数据比较进行定性分析。继而对连翘花、叶中清除自由基成分的含量进行了测定。结果如下：1通过对连翘花、叶及连翘中药清除自由基活性的测定，表明，连翘花、3～10月份连翘叶及连翘的提取物对DPPH自由基和ABTS自由基均有不同程度的清除作用。连翘花、3～10月份的连翘叶清除DPPH自由基和ABTS自由基的能力都

6、高于连翘；其中，3月份连翘叶的提取物清除自由基能力最强，这提示3月份连翘叶是清除自由基的很好的原料来源。2建立适合分离连翘花、叶及连翘中药各成分的HPLC分析方法。色谱条件为：色谱柱为SupelcosilC18柱(250rain×4．6l砌，5岬)；流动相为甲醇．0．8％醋酸水溶液梯度洗脱(0,--6min，25哆扣30％；“24rain，30％一35％；24~29rain，35％rv39％：29~39min，39‰45％；39～50rain，45％-．-60％甲醇)；检测波长280nill；流速1．OmL／min；柱温25℃。3采用HPLC．DPP

7、H离线法分析连翘花、叶中清除自由基的成分。结果发现，连翘叶中的1、2、3、4、6号峰对DPPH自由基有清除作用。利用化合物的最大吸收波长、质谱图和标准品保留时间进行鉴定，l号峰为绿原酸、4号峰为连翘酯苷、6号峰为芦丁。同时鉴别出8号峰为连翘苷。4利用HPLC法对连翘花、叶及连翘中药中的绿原酸、连翘酯苷、芦丁、连翘苷的含量进行了测定。结果显示，3月份连翘叶中绿原酸和连翘苷的含量最高，而芦丁在连翘花中含量最高。连翘酯苷在连翘叶生长的中期含量高于其他阶段。由上述结果可知，连翘花、3--'10月份连翘叶提取物对DPPH和ABTS自由基清除能力都高于连翘中药。

8、其中，3月份连翘叶的提取物清除自由基能力最强，绿原酸的含量最高。这说明在我国的河北和陕西等地的人们采摘连翘嫩