色素上皮源性因子对海马神经元和皮层神经元生长的影响

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1、上海交通大学硕士学位论文色素上皮源性因子对海马神经元和皮层神经元生长的影响姓名:傅聪申请学位级别:硕士专业:神经生物学指导教师:陆佩华;林琳20070501上海交通大学医学院2004级硕士学位论文中文摘要色素上皮源性因子对海马神经元和皮层神经元生长的影响中文摘要目的:建立胚胎大鼠海马神经元和皮层神经元体外培养技术,了解色素上皮源性因子(PEDF)对海马神经元的营养支持和促突起生长作用,以及对皮层神经元过氧化氢损伤的保护作用。方法:1)建立胚胎大鼠海马神经元体外培养技术。采用免疫荧光染色显示神经元的形态,Neurolucida测量神经元突起长度,由此观察PEDF对海马神经元存

2、活和突起生长的影响。2)建立胚胎大鼠皮层神经元体外培养技术,采用过氧化氢构建皮层神经元体外损伤模型,测量LDH释放值,以观察PEDF对皮层神经元损伤的保护作用。结果:1)PEDF可提高海马神经元的存活率,并对存活细胞的活力和突起生长有明显促进作用。2)PEDF可以促进海马神经元的突起生长,并具有一定的剂量依赖性。低浓度(25ng/ml)PEDF相对有利于轴突生长,而高浓度(100ng/ml)PEDF相对有利于树突生长。3)PEDF可以保护皮层神经元免受低浓度(500µM)过氧化氢损伤,并具有剂量依赖效应。但对高浓度过氧化氢(2000µM)引起的神经元损伤没有保护作用。上海交

3、通大学医学院2004级硕士学位论文中文摘要结论:PEDF对海马神经元具有营养作用,可以提高神经元的存活率,促进神经元突起生长。调节PEDF的浓度可以调节海马神经元树突和轴突的生长。PEDF能使皮层神经元免受过氧化氢损伤,具有神经保护作用。关键词:中枢神经,海马神经元,皮层神经元,神经营养,突起,神经保护,过氧化氢上海交通大学医学院2004级硕士学位论文英文摘要AbstractObjective:ToinvestigatetheeffectsofPEDFonthesurvivalandneuriteoutgrowthofhippocampalneuronsindifferen

4、tcultureconditions,andthesurvivalofcorticalneuronsafterexposuretoHydrogenPeroxide.Methods:1)Ratembryonicderivedhippocampalneuronswereculturedinvitroindifferentmediums.HippocampalneuronswereidentifiedbyimmunofluorescenceandthelengthofneuritewasmeasuredbyNeurolucida.2)Ratembryonicderivedcort

5、icalneuronswereculturedinvitro.HydrogenPeroxidewasusedtoinduceneuroninjury.Lactatedehydrogenase(LDH)releasewasmeasuredtoinvestigatetheneuroprotectiveeffectofPEDFonthecorticalneurons.Results:1)PEDFcouldincreasethesurvivalofhippocampalneuronsandpromotetheneuriteoutgrowthofsurvivalneurons.2)F

6、urthermore,ourdatashowedthatPEDFpromotedtheneuriteoutgrowthofrathippocampalneuronsinadose-dependentmanner.Andlowerconcentration(25ng/ml)ofPEDFincreasedtheprimaryneuriteoutgrowthwhilehigherconcentration(100ng/ml)ofPEDFpromotedthesecondlyneuriteoutgrowth.3)TreatmentwithH2O2inducedsignificant

7、deathofcorticalneuronsinadose-dependentmanner.TreatmentwithPEDFpriortoinsultgreatlyattenuatedlowerconcentration(500µM)上海交通大学医学院2004级硕士学位论文英文摘要ratherthanhigherconcertration(2000µM)ofH2O2inducedcytotoxicity,anditseffectwasshowntobedosedependent.Conclusion:1)PEDF

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