血小板源性生长因子对人视网膜色素上皮细胞的作用

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1、血小板源性生长因子对人视网膜色素上皮细胞的作用　　摘要:目的观察血小板源性生长因子（PDGF）对人视网膜色素上皮细胞（hRPE）增殖和移行能力的影响.方法将体外培养的第4～6代人视网膜色素上皮细胞分为DMEM组（改良型Eagle培养液）和含有20mL・L-1小牛血清的DMEM组（20g・L-1DMEM），每组分别加入不同浓度（0.1，1，5，10，50和100μg・L-1）的PDGF，然后采用MTT比色法观察分析其对hRPE的增殖作用;应用hRPE损伤模型，计数进入缺损区的细胞，定量

2、观察PDGF对hRPE移行的影响.结果①增殖作用:0.1～100μg・L-1的PDGF均能促进hRPE的增殖，DMEM组10μg・L-1时促增殖作用最明显，增殖率达153%;20g・L-1DMEM组50～100μg・L-1的增殖率为174%，作用最强.②移行作用:PDGF能够显著促进hRPE的移行，并呈剂量依赖性，50～100μg・L-1时促移行能力最强，DMEM组移行率为510%，20mL・L-1FBS+DMEM组达640%.结论PDGF能

3、够促进hRPE的增殖和移行，有血清时可以加强这种作用，提示它在PVR的发病过程中可能发挥了重要作用.　　Keyanretinalpig-mentepitheliumcells;proliferation;migration　　Abstract:AIMToinvestigatetheeffectsofplatelet-derived　groigrationofculturedhumanretinalpigmentepitheliumcells（hRPE）.METHODSCulturedhRPEofthe4～6thpassage

4、odifiedEagle’smedium）and20mL・L-1FCS+DMEM（20g・L-1DMEM）.PDGF（0.1～100μg・L-1）edium.RPEprolifera-tionesuredbycolorimetricassayforcellulargroodelinallareaofaconfluentmonolayerofhRPEedi-um，migrationeasuredafter24hoursasthenumberofcellsthathadenteredth

5、edenudedarea.RESULTS①Pro-liferation:PDGFstimulatedtheproliferationofhRPE.ThemaxiumproliferationrateofRPEulatedhRPEmigrationinadose-dependentmanner.At50～100μg・L-1，themaxiummigrationrateulateshRPEprolif-erationandmigration，thepresenceofserumcanincreasethiseffe

6、cts，plythatPDGFmayplayanimportantroleinthedevelopmentofproliferativevitreoretinopathy.　　0引言　　在增生性玻璃体视网膜病变患者的玻璃体和视网膜下液中已检测到明显增高的血小板源性生长因子（PDGF）［1］，一些体外实验表明，培养的视网膜色素上皮细胞（hRPE）能够自分泌或旁分泌PDGF并表达其受体［2］.由于该因子对多种细胞有促有丝分裂活性和化学趋化性，而且参与创面愈合的全过程［3］，我们采用体外培养的方法，观察PDGF对人视网膜色素上皮细

7、胞（hRPE）增殖和移行能力的影响.　　1材料和方法　　1.1材料Delbecco’smodifiedEagle’smedium（DMEM，Gibco，USA），小牛血清（杭州四季青），胰酶（Gibco，USA），3-2，5-二苯基四氮唑溴盐（MTT，Sigma，USA），人重组PDGF-BB（Sigma，USA），12孔、96孔培养板（NUNC，丹麦），丝裂霉素（Sigma，USA），二甲基亚砜（DMSO，Sigma，USA），Bio-Red550型酶联免疫检测仪（日本）.　　1.2方法人RPE细胞由西京医院眼科王雨生副教

8、授惠赠［4］的四种不同的人视网膜色素上皮细胞，第4～6代用于实验.复苏与培养方法同王琳等［5］报告.增殖实验以含100mL・L-1小牛血清的DMEM将细胞浓度调整为2×107・L-1，接种于96孔板（200μL/孔），37℃，50mL・L-1CO2