脓毒症大鼠模型中脑损伤的磁共振波谱变化研究

《脓毒症大鼠模型中脑损伤的磁共振波谱变化研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、脓毒症大鼠模型中脑损伤的磁共振波谱变化研究Studythecorrelationofmagneticresonancespectroscopychangeandbraininjuryintheratmodelofsepsis课题来源：自选学位申请人导师姓名专业名称培养类型培养层次所在学院温妙云曾红科教授急诊医学委培硕士第二临床医学年月日剞红硕士学位论文脓毒症大鼠模型中脑损伤的磁共振波谱变化研究硕士研究生：温妙云指导教师：曾红科教授摘要lIlllIIlllUIllIlllUIY2618441研究背景：脓毒症相关性脑病(Sepsisas

2、sociatedencephalopathy，SAE)是一种获得性脑损伤综合征，指大脑在没有直接感染的临床或实验室证据的前提下，因全身对感染反应所引起的弥漫或多灶性的脑功能障碍。ICU中SAE的发病率在9％～71％；有研究发现脓毒症合并有SAE的死亡率(49％)明显高于没有神经症状(26％)的患者；SAE不但有较高的住院死亡率(16％～63％)，对于存活患者也可能存在认知功能障碍。由于目前SAE的发病机制尚不明确，亦无确切的诊断标准，临床诊断主要依靠电生理、生化检测及影像学辅助检查，同时需排除其它代谢和结构异常性脑病。但现有的辅助检

3、查却存在一定的局限性。如蝴(E1ectroencephalography，EEG)检查的敏感性虽高，但缺乏特异性，且不能应用于处于镇静或代谢紊乱的患者。体感诱发电位(SomatosensitiveEvokedPotentials，SEPs)由于操作繁琐临床中不能经常实旖，有研究认为其严重程度与临床表现不存在相关性。SAE患者的脑脊液(Cerebrospinalfluid，CSF)检查也基本正常。神经元特异性烯醇化酶(Neuron—SpecificEnolase，NSE)和$100beta血清蛋白曾经被提出作为诊断SAE的生物标记物，

4、但有不少研究认为NSE在血清及脑脊液的浓度与SAE诊断不符；$100beta血清蛋白的升高与神经系统损伤的严重程度不相关。SAE患者的头颅计算机断层扫描(ComputedTomography，CT)通常未能发现异常信号。磁共振成像(Magneticresonanceimaging，MRI)对部分SAE患者的检查可发现异常，但阳性率低。而磁共振波谱(Magneticresonancespectroscopy，MRS)是一种可对活体组织进行定量分析代谢化合物的无创检测技摘要术。其检测与脑损伤有关的代谢化合物NAA、Cho、Cr分别代表神

5、经元的完整性、损伤恢复和能量代谢。目前该技术已成熟应用于创伤性脑损伤、缺血缺氧性脑病、颅内感染等疾病的诊断和评估。目的：通过对脓毒症大鼠模型脑部磁共振波谱研究，为脓毒症引起脑损伤的早期诊断和评估探索一种较为可靠的无创性诊断技术。方法：将35只SD雄性大鼠随机分为4组：对照组(n=5)、脓毒症6h组(n=10)、脓毒症12h组(n=10)、脓毒症24h组(n=10)。实验组大鼠予LPS30mg／kg的剂量进行腹腔注射建立脓毒症模型；而正常对照组给予等量的生理盐水。实验组分别在建模后对应时间点6h、12h、24h经腹腔注射3％戊巴比妥钠

6、溶液(0．2mL／lOOg)进行麻醉；对照组予注射生理盐水后24h进行同样麻醉。待麻醉成功后将大鼠头部固定在特制的有机玻璃立体定向仪的支架上，完成大鼠头颅磁共振形态学成像和右侧海马波谱分析。所有成像在7T、30cm水平钻孔的磁体中(德国BRUKER公司，型号：Biospec70／20USR)完成，同时使用G060梯度设置和全身多梯度38mm谐振器。磁共振检查结束后，立即打开处于麻醉状态大鼠的胸腔，暴露心脏。用注射器从心尖部插入左心室采集血液标本后(4。C，3000rpm转速离心10分钟，分离出血清以0．5mlEP管分装，-70。C保

7、存，为检测NSE和SlOObeta血清蛋白浓度备用)，在右心耳处剪-,5口放血，先以150mLO．9％氯化钠溶液快速灌注，然后减慢灌注速度直至从右心耳处流出清亮的液体，再以溶于0．1mol／L磷酸盐缓冲液(PBS)的4％多聚甲醛150mL继续灌注固定1h。随后打开大鼠颅骨，取其脑组织固定于4％多聚甲醛中备用(取右侧脑组织，脱水，石蜡包埋，常规制备厚度为8um的切片，进行HE、Nissl及TUNEL染色，于显微镜下观察海马组织的病理变化)。结果：35只SD雄性大鼠结果在对应时间点6h组死亡3只，存活7只(死亡率30％)；12h组死亡4

8、只，存活6只(死亡率40％)；24h组死亡3只，存活7只(死亡率30％)。与对照组比较，脓毒症组共20只存活大鼠全部出现精神萎靡不振、竖毛、嗜睡，眼鼻渗血、拉稀等脓毒症表现，12h组和24h组尤为明显。与对照组比较，脓毒症6h组、12