实验高压电烧伤血清gpⅱbⅲα、gpⅰbibⅸv动态变化及己酮可可碱的干预作用

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1、河北医科大学硕士学位论文实验高压电烧伤血清GPⅡb/Ⅲα、GPⅠb/Ib/Ⅸ/V动态变化及己酮可可碱的干预作用姓名：陈文婷申请学位级别：硕士专业：外科学指导教师：张庆富201203中丈摘要实验高压电烧伤血清GPIIb／llla、GPIb／Ⅸ／V动态变化及己酮可可碱的干预作用摘要目的：通过前期的实验研究，可以观察到实验高压电烧伤后动物活体软脑膜、深筋膜、胃黏膜、册脏、肠系膜、肠黏膜、肾皮质等的微循环变化，发现高压电流一方面可使局部组织微循环失调，而且还使远隔器官的微循环紊乱，从而导致全身的微循环障碍，导致机体组织和器官损伤。微观上可以观察到血细胞流变学变化，包括白细胞附壁与黏附

2、、血小板聚集、红细胞聚集以及微小血栓形成等。已有实验证明血小极膜瓣蛋白GPIIb／IIIa(CD41／CD61)、GPIb／IX／V(CD42)在血小板聚集、黏附及早期血栓形成中起着重要作用，GPIIb／IIIa浓度升高及GPIb／IX／V浓度降低是血小板活化的重要标志之一。我们设计此实验目的在于通过观察高压电流对血小板膜糖蛋白GPlIb／IIIa、GPIb／IX／V的影响，进～步探讨高压电烧伤微循环紊乱的机制，及己酮可可碱(PTX)对血清血小扳膜糖蛋白表达的干预作用，为高压电烧伤后微循环障碍的防治提供理论依据。方法：1．实验动物分组：健康成年雄性SD大鼠(河北医科大学动物实

3、验中心提供，合格证编号832457)90只，按随机数字表法分成三组，即假高压电烧伤组(简称对照组)、高压电烧伤实验组(简称实验组)、高压电烧伤己酮可可碱(PTX)治疗组(简称治疗组)，每组各30只。以上三组又分别分为点击前15min(To)、电击即刻(5min内)(T1)、电击后lh(T2)、2h(T，)、4h(T4)、8h(T；)6个不同的时相，每组5只。各组分别编号后分笼饲养。2．实验前准备：将大鼠编号、称重、左上肢及右上肢脱毛，记录数据。将实验药品配成所需浓度。3．高压电烧伤模型复制：正确连接实验变压器及调压器，待用。l％戊巴比妥钠溶液麻醉大鼠(40mg／kg)，待麻醉

4、成功后，备皮大鼠左上肢、右下肢及胸部，将大鼠仰卧于动物绝缘台上，四肢伸展，固定于高压输出电路之间，分别固定lcm2圆形铜制电极片于大鼠的左上肢、右下肢脱毛中文摘要区，左上肢为电流入口，右下肢为电流出口。接通电源，调整变压器输出电压1KV，电击实验组与治疗组实验动物各3s，对照组给予假电(即只连电线，不通电)，其他条件各组均相同。电击后即刻，治疗组于腹腔内注射I％PTX(按50mg／kg即5mL／kg给药)，对照组及电击组电击后即刻于腹腔内注射5mL／kg生理盐水。4．标本采集与保存：将复制成功的高压电烧伤大鼠模型麻醉、开胸，直视下心脏取血，收集4mL全血，并置于普通塑料试管中

5、，静置约30分钟，待血清析出后上离心机以3000转／min离心，离心10min，取上清液，于Eppendorf管中．70℃保存待用。5．指标检测：采用ELISA双夹心抗体法，检测高压电烧伤后不同时相血清中GPIIb／IIIa、GPIb／IX／V浓度的动态变化，及PTX对二者的干预效果。6．实验数据处理：所得数据为计量资料，则用SPSS13．0统计软件进行分析处理，实验数据均以均数±标准差(页±S)表示，采用完全随机设计的单因素方差分析(ANOVA)对实验得到数据进行分析，以p<0．05为有显著性差异。．结果：血清GPIIb／Ilia、GPIb／IX／V的变化：(I)对照组组内

6、比较无统计学意义(p>0．05)，可认为对照组组内各水平无显著性差异。(2)高压电烧伤后实验组T1～T4时相血清GPIIb／IIIa水平高于对照组及电击前(TO)GPIIb／Ilia的水平(p<0．05)，T5时相GPIIb／IIIa水平较对照组及电前无显著性差异(p>0．05)，GPIIb／IIIa表达水平电击后即刻即达高峰，以后随时间下降，至电击后8h恢复至电击前水平：高压电烧伤后血清GPIb／IX／V早期实验组T1、T2时相水平低于对照组及电击前的水平(p0．05)，GPIb／IX／V

7、表达水平电击后即刻降低，至电击后2h恢复至电击前水平。(3)高压电烧伤后早期PTX治疗组Tl～T4时相血清GPIIb／IIIa水平高于对照组及电击前水平(p<0．05)，但较同一时相电击组血清水平有不同程度下降(p<0．05)，T5时相PTX治疗组GPIIb／IIIa的水平较对照组、电击前及电击组无显著性差异(p>0．05)；高压电烧伤后PTX治疗组T1、中文摘要T2时相血清GPIb／IX／V水平低于对照组及电击前水平(p<0．05)，较同一时相的电击组水平升高，T3"T5时相PTX治疗组GPIb／IX