黄芪多糖对2型糖尿病大鼠肝脏insr及其底物irs-2表达的影响

《黄芪多糖对2型糖尿病大鼠肝脏insr及其底物irs-2表达的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、新乡医学院硕士学位论文黄芪多糖对2型糖尿病大鼠肝脏InsR及其底物IRS--2表达的影响姓名：孙芳申请学位级别：硕士专业：内科学指导教师：翁孝刚201204新乡医学院硕士学位论文黄芪多糖对2型糖尿病大鼠肝脏InsR及其底物IRS．2表达的影响摘要背景大量流行病学资料显示，胰岛素抵抗(insulinresistaIlce，IR)与2型糖尿病的发生发展关系密切，而胰岛素受体底物(insulinrec印torsubs仃．ate，IRS)与2型糖尿病取密切相关，IRS以取S．1和mS．2为主。胰岛素受体(insulinreceptor，

2、hlsR)和RS-2是肝脏胰岛素信号转导核心分子，其基因缺失或信号网络上一些关键信号分子的异常改变，都将导致肝脏胰岛素信号转导能力减弱，出现肝胰岛素抵抗。有研究表明，黄芪多糖(aS缸Iagalusp01ysacdl撕des，APS)可以改善R，但APS是否通过影响肝脏111sR、取S．2表达而改善肝脏R及其作用机制尚需进一步研究。目的建立以胰岛素抵抗为特征的2型糖尿病大鼠模型，观察APS对模型大鼠肝脏InsR、IRS．2蛋白表达的影响，及其对瓜相关指数的影响，探讨APS改善2型糖尿病肝胰岛素抵抗的作用机制，为糖尿病的治疗提供实验

3、依据。方法健康雄性SD(sprague—Dawley)大鼠60只，体重240．2609，适应性喂养1周后随机分为正常对照组(NC组，n=10)，给予标准饲料；高脂模型组(HFM组，n=50)，给予高脂饲料。喂养6周末，HFM组的平均体重较NC组平均体重升高20％，认为肥胖大鼠造模成功。HFM组继而用小剂量链脲佐菌素(STZ，25mg／kg)腹腔注射建立2型糖尿病大鼠模型。72h后尾静脉采血测量随机血糖，随机血糖>16．7mmol／L的大鼠纳入糖尿病模型组，并在STZ注射2周末复查随机血糖，将血糖未达标大鼠剔除出组。将造模成功大鼠

4、(n=39)随机分为糖尿病对照组(DMC组，生理盐水灌胃，n=13)、吡格列酮组(Pio组，20IIlg瓜g．d吡格列酮灌胃，n=13)和黄芪多糖组(APS组，400mg／l【g．dAPS灌胃，n=13)，同时NC组给予生理盐水灌胃，各组饮食不变，药物干预4周。第12周末予10％水合氯醛腹腔麻醉，心内取血用于检测血浆空腹血糖(FBG)、血清胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、空腹胰岛素(FINS)，并计算胰岛素敏感指数(ISI)。分离附睾脂肪垫、肾周及网膜脂肪并称重，计算内脏脂肪含量(VF侧)。心内灌注固定后取大鼠肝脏组织，置于1

5、0％多聚甲醛中固定。采用HE染新乡医学院硕士学位论文色观察肝脏组织形态学变化，免疫组织化学方法测定肝脏组织IIlsR和RS一2蛋白的表达。并对InsR、IRS．2与FINS、ISI、VF脚之间进行相关分析。采用SPSS16．0统计软件对实验结果进行分析，正态性检验a取0．2为检验水准，以均数士标准差(x蛔)表示实验结果。两组间均数比较采用t检验，多组间均数的比较采用单因素方差分析(One．wavANOVA)，组间两两比较采用最小显著性差(LSD)检验，两变量之间的相关性采用Pearson直线相关分析，P

6、义。结果1．高脂饲养喂养6周后可诱导SD大鼠明显腹型肥胖，HFM组体重显著增加，与NC组比较，差别有统计学意义(P<0．05)；HFM组和NC组大鼠随机血糖比较，差异无显著性(胗O．05)。小剂量链脲佐菌素(STZ，25mg／l【g)腹腔注射造模后，模型组大鼠随机血糖水平显著升高，差异有统计学意义(P

7、升高，差异均有统计学意义(氏O．05)。APS和Pio组比较，上述各项指标差异无统计学意义(胗0．05)。光镜下观察各组大鼠肝脏组织形态：和NC组比较，DMC组大鼠肝脏出现明显脂肪变性，差异有统计学意义(氏0．05)；和DMC组相比，Pio组及APS组大鼠肝脏脂肪变性得到明显改善，差异有统计学意义(氏0．05)；APS组和Pio组相比，大鼠肝脏脂肪变性差异无统计学意义(胗0．05)。免疫组织化学检测：和NC组相比，DMC组、Pio组及APS组InsR、瓜S．2染色平均光密度降低，差异有统计学意义(P<0．05)；和DMC组相比较

8、，Pio组及APS组InsR、瓜S．2染色平均光密度升高，差异有统计学意义(尸．<0．05)；Pio组和APS组相比，差异无统计学意义(胗O．05)。相关性分析显示，111sR蛋白表达水平与FINS呈负相关，(严．O．463仁O．001)，与VF脚呈负相关(严．