黄芪多糖对2型糖尿病模型大鼠ampk、ucp2表达的影响

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1、新乡医学院硕士学位论文黄芪多糖对2型糖尿病模型大鼠AMPK、UCP2表达的影响姓名：王晓宇申请学位级别：硕士专业：内科学指导教师：翁孝刚201203新乡医学院硕士学位论文——————————————————————————————————————————————————————一黄芪多糖对2型糖尿病大鼠AMPK、UCP2表达的影响摘要背景：2型糖尿病(T2DM)作为作为最常见的内分泌代谢疾病，在近些年，发病率逐年上升，胰岛素抵抗(IR)是T2DM的发病基础。而信号转导异常是IR的一个重要机制，有研究显示，黄芪多糖(APS)可以改善胰岛素抵抗，提高胰岛素敏感性

2、，调节糖、脂代谢，但是其深层的机制尚未完全研究清楚。目的：观察APS对2型糖尿病大鼠肝脏腺苷酸活化蛋白激酶(AMP．activatedproteinkinase；AMPK0【)及胰腺解耦连蛋白2(uncouplingproteins2；UCP2)在基因和蛋白水平表达的影响，探讨APS改善胰岛素抵抗(IR)的可能作用机制，为今后APS应用于临床提供理论依据。方法：(1)随机选用健康雄性SD(Spa嬉ue—Dawley)大鼠60只，体重210-2309，适应性喂养1周后随机分为空白对照组(NC组，n=10)和高脂模型组(HFM组：n=50)，分别给予标准饲料和高

3、脂饲料喂养。同时每周记录大鼠体重(BW)，喂养6周术，HFM组的平均体重较NC组平均体重大于20％，认为肥胖大鼠造模成功。(2)HFM组继而应用链脲佐菌素(Steptozotocin，STZ，25mg／蚝)腹腔注射建立2型糖尿病大鼠模型。72h后尾静脉采血测量随机血糖，随机血糖>16．7mmol／L的大鼠纳入糖尿病模型组，并在STz注射2周术复查随机血糖，把血糖<16．7mmol／L大鼠剔除出组。将造模成功大鼠(n=45)随机分为4组，分别为糖尿病对照组(DMC组，生理盐水灌胃，n=12)、吡格列酮组(Pio组，20mg／kg·d吡格列酮灌胃，n=11)、黄

4、芪多糖组(APS组，400mg／kg·dAPS灌胃，n=11)和黄芪多糖+吡格列酮组(APP组，400mg／kg·dAPS和20mg瓜g·d吡格列酮灌胃，n=11)，同时NC组给予同体积生理盐水灌胃，各组饮食不变。(3)药物干预4周后，将各组大鼠予10％水合氯醛腹腔麻醉，心内取血用于检测血浆空腹血糖(FBG)，血清胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、空腹胰岛素(FINS)，并计算胰岛素敏感指数(ISI)。分离附睾脂肪挚、肾周及网膜脂肪并称重，计算内脏1新乡医学院硕士学位论文脂肪含量(VF／W)。采用半定量逆转录PCR法(InPCR)检测肝脏AMP№及胰腺ucP

5、2mI矾A的相对表达量，采用免疫印迹法(Westem．Blotting，wB)测肝脏AMPKCc、磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(phospho．AMP．activatedproteinkinase；p-AMPK0【)及UCP2蛋白表达水平。结果：(1)．高脂饲养6周可诱导SD大鼠明显肥胖，HFM组体重显著增加，与NC组比较，差异有显著性(P<0．01)；两组大鼠之问随机血糖比较，差异无显著性(P>0．05)。STz造模后，模型大鼠随机血糖水平显著升高，差异有显著性(P

6、TG、TC、FINS及VF／W水平升高，ISI水平降低，差异均有统计学意义(P0，05)。(3)．RT-PCR检测：和NC组比较，其它各组的AMPK0【的mRNA表达量降低，差异有统计学意义(尸<0．05)。同DMC组比较，APS组、Pio组、APP组的AMPK0【的mRNA表达量升高，差异有统计学意义(尸<0．05)。

7、同APP组比较，Pio组、APS组的AMPKO【的mRNA表达量降低，差异无统计学意义(尸>O．05)。Pio组、APS组的AMPKa的mRNA差异无统计学意义。和NC组比较，余下4组的UCP2的mRNA表达量升高，差异有统计学意义(PO．05)。(4)．westem．Blotting检测：和N

8、C组比较，DMC组、APS组、Pio组、APP组的A