调理冬季奶牛冷应激蒙药复方的筛选及其作用和机制的研究

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1、分类号S821.1学校代码10129UDC11.220学号2009201054调理冬季奶牛冷应激蒙药复方的筛选及其作用和机制的研究SelectingAnti-coldStressCompoundMongolianMedicineandStudyingitsRegulationandMechanismonCowsinWinter申请人：姜艳学科门类：农学学科专业：基础兽医学研究方向：动物生理学调控指导教师：王纯洁教授论文提交日期：二〇一二年六月摘要为了筛选冬季抗奶牛冷应激的蒙药并研究其调理作用和机制，进行以下实验：利用正交设计法通过小鼠低温（-10℃）存活

2、时间和冷水（10℃）游泳时间指标筛选抗冷应激蒙药复方；实验室阶段通过持续6℃冷应激小鼠0h、2h、24h，每天1h间歇冷应激10d、20d建立急、慢性冷应激模型，临床研究阶段以冬季冷应激期的荷斯坦奶牛为对象，研究抗冷应激蒙药复方的调理作用和机制，测定血清酶活力、内分泌激素及细胞因子水平、免疫功能及行为指标。主要实验方法和结果如下：①筛选-10℃低6温存活时间和10℃冷水游泳时间极显著高于灌水对照组的L25(5)正交实验第21号蒙4药复方即哈伦-1汤及L9(3)正交实验第5号蒙药复方即哈伦-2汤用作雌、雄动物复方(p﹤0.01）。②对小鼠称重法测定脏器指数

3、、MTT法测定脾脏NK细胞活性、腹腔吞噬鸡红细胞法测定吞噬功能，结果：两蒙药复方能显著提高脏器指数、NK细胞活性和吞噬细胞的吞噬功能(p﹤0.05）。③流式细胞术研究结果：蒙药复方能提高小鼠+++++CD3、CD4、CD19细胞百分率(p＞0.05)，显著提高CD4/CD8比值(p﹤0.05），高++剂量蒙药复方显著降低CD8细胞百分率(p﹤0.05）；蒙药复方能显著提高奶牛CD14细胞百分率(p﹤0.05）。④放射免疫测定结果：蒙药复方能显著提高冷应激小鼠Cort(p﹤0.05），高剂量蒙药复方显著提高小鼠慢性冷应激期IL-2(p﹤0.05）；显著提高

4、奶牛IFN-γ、IgG、IL-2(p﹤0.05）。⑤用酶标仪和紫外可见分光光度计检测结果：蒙药复方能显著降低小鼠和奶牛的CK、GOT、AKP(p﹤0.05）。⑥蒙药复方显著减少小鼠攀爬、分散静卧、游走、探望观察行为(p﹤0.05）；蒙药复方显著增多奶牛反刍时间、排粪排尿次数(p﹤0.05）。⑦蒙药复方提高奶牛平均体温、平均皮温、直肠温度(p＞0.05)，降低呼吸频率(p＞0.05)；蒙药高剂量组提高乳糖、乳脂、乳蛋白、非脂固形物、产奶量(p＞0.05)。结论：哈伦-1汤和哈伦-2汤可显著提高急慢性冷应激小鼠的非特异性和细胞免疫及慢性冷应激奶牛的非特异性和

5、细胞免疫功能；蒙药复方能显著降低小鼠和奶牛的冷应激造成的心肌、肝脏、骨骼肌乃至肾脏的损伤；蒙药复方显著减少冷应激小鼠不安行为并对小鼠和奶牛采食及其他应激行为等也产生影响；蒙药复方在一定程度上能够提高冬季奶牛抗冷应激能力，不使生产性能降低。关键词：蒙药复方；冷应激小鼠及奶牛；生化指标；激素及细胞因子；行为SelectingAnti-coldStressCompoundMongolianMedicineandStudyingitsRegulationandMechanismonCowsinWinterAbstrctInordertoselectanti-co

6、ldstressCompoundMongolianMedicineandstudyitsregulationandmechanismoncowsinwinter，donefollowingexperiment:usedorthogonalexperimentmethodandlow-temperaturesurvivaltimeandthecoldwaterswimmingtimetoscreeninganti-coldcompoundMongolianmedicine；atlaboratorystage，establishedacuteandchron

7、iccoldstressmodelthroughcontinuous6℃coldstress0h、2h、24hand1h/dintermittentcoldstress10d、20donmice，theanimalofclinicalresearchwasHolsteincowsinthewinter,detectedenzymeactivity,hormoneandcytokinelevelsofserum,immunefunctionandbehavior.Themainexperimentalmethodsandresultsareas64foll

8、ows:①thelifetimeofmicefeddingNo.21groupo