大豆疫霉拮抗菌株的筛选、鉴定及拮抗作用

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1、安徽农业大学硕士学位论文大豆疫霉拮抗菌株的筛选、鉴定及拮抗作用姓名：杨光红申请学位级别：硕士专业：植物病理学指导教师：高智谋201206摘要大豆疫霉砌y幻砌砌DmsD廊P是农业生产上极为重要的植物病原菌之一，由其引起的大豆疫病是大豆生产上的毁灭性病害之一。筛选具有生防潜力的大豆疫霉拮抗菌，可以为寻找病害措施和设计新的疫病控制策略提供基础。本学位论文在大豆疫霉拮抗微生物筛选的基础上，对2株拮抗效果较好的细菌菌株BY．2、BZ．2进行了鉴定，并对其离体及活体拮抗作用以及促生长作用进行了研究，主要研究结果如下：1、采用平板对

2、峙法和杯碟法分别对本实验室保存的哈茨木霉(删砌D如删口^口rzfaM聊)TH．1菌株及枯草芽孢杆菌(曰以cf刀螂s“6疗凰)BS菌株以及6株粉红单端孢(研c矗D砌gcf“m，DJP“m)菌株进行了平板抑菌作用及代谢产物活性测定，结果表明，它们对大豆疫霉的拮抗效果均不显著。2、从安徽省大豆疫病田采集的大豆根际土壤中分离得到4株大豆疫霉拮抗细菌，平板对峙试验显示，其中拮抗细菌菌株BY-2和BZ．2在第5d时对大豆疫霉的平板抑制效果分别为79．O％和63．97％。对菌株BY_2、BZ一2进行了鉴定。经形态观察、生理生化特性测

3、定、扫描电镜观察及16SrDNA、gyrB序列分析，鉴定上述两菌株均为枯草芽孢杆菌(曰口cf，胁s甜6疗凰)。3、测定了不同时间的BY-2代谢液对大豆疫霉的抑制活性，结果显示，72h代谢液对供试病原菌的菌丝生长抑制效果最好；BY-272h代谢液对供试病原菌AHl9的抑制效果显著高于其他各菌株，抑制效果达到40．93％。BY_2菌株72h代谢滤液能显著抑制游动孢子萌发，培养滤液处理24h后孢子萌发抑制率为57．71％，且24h后孢子萌发抑制率显著高于其他各处理。4、采用培养皿对扣法，测定了BY_2菌株挥发物对大豆疫霉的抑

4、制活性。结果表明，BY-2挥发物处理对供试大豆疫霉菌株的菌丝生长均有显著的抑制作用，但抑制率随菌株和处理时间不同而有显著差异，其中对菌株AHl9处理第7d时的抑制率最高，为91．94％。5、对筛选获得的生防菌株进行了盆栽试验测定，结果显示菌株BY-2提前3d浸根接种对大豆疫病的防效显著高于各处理，接种10d后调查防效为75．01％；BY-2菌液处理同时还可显著地促进大豆幼苗的生长；处理的鲜重干重都显著地高于对照，分别增加了63．16％、43．48％，根长和茎长也都显著高于对照，分别比对照增加56．57％、6．95％。6

5、、研究了温度、pH、接种量和培养时间对菌株BY-2的影响，结果表明，菌株BY-2最适生长温度为30℃，最适pH为7．O，最适接种量为2％，最适培养时间为48h，为下一步生防菌剂的开发提供依据。关键词：大豆疫霉，拮抗菌，筛选，鉴定，拮抗作用AbstI．act脚印Jll砌D阳sQ廊eisoneoftheVe巧importantplalltpatllogenicorgaIlismsina面culturalproduction．SoybenPh)吨ophmorabliglltcausedbytheoomyceteisadest

6、mctiVediseaseofsoybeallintheworld．Screeningofpotentiala11tagonisticbact谢aagainst脚印矗砌Dms咖口willbehelp向1for6ndingnewtargetsofcheIIlicalcon仃olandproVidinggoodideasfordesigningnewcon勃rolsb．ate百es．BasedonthescreeningmicroorgaIlismsagainst脚印^砌DmsQ尬e，theidentificationof

7、strainBY一2andBZ一2andtheiraultagonisticactiVitiestoP．sQ尬Pwerecarriedoutinthisp印既Themainresultswereasf’ollows：1．Byusingag扑platedualcultureandtheCupplatemethod，theiIlllibitoryactiVititiesofmesix乃·fc矗D砌ecf甜m，琊e“聊s仃ainsand乃记办D(纪，．m以办口圮胁儿f聊s仃ainTH一1andB以cf，胁s“6疗Z如s昀in

8、BSkeptiIlour1aboratorywereinVestigatedrespectiVdy，aIldmeresultsshowedthatmeinhibito巧e妇暗ctsoftheseisolateswerea11notsi弘ificantagainstPs咖P．2．Fourantagonisticbacterialst