人参皂苷rb1抑制自体静脉移植物内膜平滑肌细胞增生的研究

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1、郑州大学硕士学位论文人参皂苷Rb1抑制自体静脉移植内膜平滑肌细胞增生的研究姓名：乔洪武申请学位级别：硕士专业：外科学指导教师：徐敬201204摘要人参皂苷Rbl抑制自体静脉移植物内膜平滑肌细胞增生的研究硕士研究生：乔洪武导师：徐敬教授郑州大学第一附属医院心血管外科河南郑州450052摘要背景与目的冠脉动脉旁路移植术是治疗冠状动脉粥样硬化性心脏病(CoronaryAtheroscleroticHeartDisease，简称冠心病)的主要方法之一，自从Favaloro!lJ首次将大隐静脉应用于冠状动脉旁路移植术以来，大隐静脉

2、由于具有来源丰富，口径较大，易于吻合，取材容易且长度充分等特点，成为临床上主要的移植材料。但种种原因造成的移植静脉再狭窄或闭塞，使移植血管桥的使用寿命受到了一定的限制，远期疗效并不理想12l。一般来说远期通畅率1年约为80％，5年约为75％，以后每年的闭塞率为2-4％，10年约为50％13,4l，所以有一部分人需要接受二次手术。预防移植静脉再狭窄或闭塞成为了研究热点。人参皂苷Rbl是从人参中提取的单体化合物，是一种钙通道阻滞剂，有明显的阻滞ICa2+电流的作用，并且能明显抑制MCT(野百合碱)诱导的RVH(右心室肥大)，

3、具有抗心律失常的作用，还具有显著的抗血管内皮缺氧损伤、抗氧自由基等作用，有报道称：人参皂苷Rbl可通过减少内膜增生过程中增殖细胞核抗原(ProliferatingCellNuclearAntigen，简称PCNA)及转化生长因子．13(TransformingGrowthFactor-13，简称TGF．p)的基因表达进而抑制血管平滑肌细胞(vascularsmoothmusclecells，简称VSMCs)的过度增殖，减少细胞外基质的形成和分泌，起到抑制内膜过度增生、减轻移植血管再狭窄的作用，延长移植静脉的使用寿命。本实

4、验在建立兔颈外静脉．颈总动脉移植血管桥动物模型的基础上，通过腹腔注射一定剂量的人参皂苷Rbl成品，观察各组移植静脉内膜厚度和形态的变摘要化以及PCNA与TGF-13基因表达的变化，探讨人参皂苷Rbl对移植静脉桥再狭窄或闭塞的抑制作用及其作用机理，为以后的临床应用提供实验基础和理论依据。材料与方法45只健康纯种新西兰大白兔，雌雄不限，随机分为实验组、模型组、对照组3组，每组15只。应用“IIO．touch”外科技术获取右侧颈外静脉后，离断右侧颈总动脉，采用外翻连续缝合方法端端吻合颈外静脉和颈总动脉，建立颈外静脉和颈总动脉旁

5、路移植的动物模型。4周后，取出移植静脉血管，利用HE染色观察移植静脉血管内膜形态和厚度变化，并测量内膜厚度，计算内膜／中膜的厚度比，免疫组化观察静脉移植血管增殖细胞核抗原与转化生长因子．p阳性表达情况，RT-PCR检测移植静脉血管中PCNA及TGF-pmRNA的表达。结果1移植静脉HE染色结果石蜡切片HE染色光镜下观察分析结果显示：移植4周后实验组、模型组的移植静脉内膜均有不同程度的增生重构，模型组更显著，实验组、模型组、对照组移植血管的内膜厚度分别为(41．57+_2．43)1．tm、(73．76+_7．83)pm、(

6、11．38_+0．71)lam，各组间比较P<0．05，有显著差异。三组移植静脉内膜／中膜厚度比分别为(1．21_+0．09)、(1．44±0．12)、(0．28_+0．07)，各组间比较P<0．05，有显著差异。2移植静脉免疫组化染色结果观察移植4周后实验组、模型组、对照组的移植静脉内膜中均可见到PCNA、TGF．D阳性细胞表达。实验组、模型组、对照组PCNA阳性表达指数分别是(35．24_+2．31)％、(57．84+_2．79)％、(14．37+1．20)％，各组间比较P<0．05：有显著差异；移植4周后实验组、模

7、型组、对照组TGF-13阳性表达指数分别是(30．28+_1．69)％、(52．43±3．85)％、(13．57+1．13)％，各组问比较P<0．05，有明显差异。n摘要3移植静脉RT-PCR结果观察RT-PCR结果显示各组移植静脉血管中均可见PCNA及TGF．flmRNA表达，但经人参皂苷Rbl干预后，模型组PCNA及TGF．[3mRNA相对表达含量明显高于实验组和对照组，以目的基因与内参基因的积分光密度比值计算PCNA及TGF．p的相对含量；移植4周后的实验组、模型组、对照组PCNAmRNA相对含量比值分别是(0．9

8、42_+0．004)、(0．756__．0．003)、(0．574_+0．002)，各组间比较P<0．05，有显著差异；TGF．IBmRNA的相对含量比值分别是(0．921__．0．006)、(0．716_+0．003)、(O．539_+0．004)，各组问比较P<0．05，有显著差异。4相关性分析结果SPSS简单线