黄芩苷诱导大鼠口腔黏膜β-防御素基因表达的实验研究

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1、遵义医学院硕士学位论文黄芩苷诱导大鼠口腔黏膜β--防御素基因表达的实验研究姓名：李昱良申请学位级别：硕士专业：口腔临床医学指导教师：王凯201205遵义医学院硕士学位论文黄芩苷诱导大鼠口腔黏膜B．防御素基因表达的实验研究中文摘要目的：通过观察p．防御素在大鼠口腔黏膜中的固有表达和黄芩苷对p．防御素的诱导表达作用，探讨B．防御素在大鼠口腔黏膜中的基因表达水平与黄芩苷剂量和给药时间的相关性，从而为利用中药诱导B．防御素基因表达提供实验依据。方法：将188只健康Wistar大鼠随机分组：I组(固有表达组)：20只大鼠，每只分别采集牙龈、

2、颊粘膜、唾液、龈沟液样本，RT-PCR法检测大鼠B．防御素．2的基因表达情况，以rBD．2与[3-actin的IOD比值表示大鼠B．防御素．2的基因表达水平。II组(诱导表达组)：168只大鼠，随机分成三组，每组56只IIa组：对照组(等量NS灌胃)；IIb组：高剂量组(27mg／ml黄芩苷药液灌胃)；IIc组：低剂量组(13．5mg／ml黄芩苷药液灌胃)；连续灌胃给药7天，每天1次，每次lml。从第1天给药起，每组均于次日给药前随机选取8只大鼠断颈处死，以I组中大鼠6．防御素．2基因表达水平最高的组织作为取材对象，采集标本，与I

3、组实验采用相同方法检测大鼠B．防御素．2的基因表达情况，对大鼠p．防御素．2的基因表达水平与黄芩苷剂量和给药时间进行Spearman相关性分析。结果：1、生理状态下，B．防御素．2在大鼠牙龈、颊粘膜、唾液、龈沟液中均有不同程度的基因表达，在牙龈组织中表达水平最高(尸<0．01)，在龈沟液中表达水平最低(尸

4、素．2在大鼠口腔黏膜及唾液和龈沟液中存在固有表达，其在牙龈组织中的基因表达水平最高。2、大鼠口腔黏膜中的6．防御素．2可被黄芩苷诱导表达，其基因表达水平与药物剂量和给药时间存在相关性。关键词：黄芩苷大鼠B．防御素．2口腔黏膜基因表达遵义医学院硕士学位论文黄芩苷诱导大鼠口腔黏膜p-防御素基因表达的实验研究StudyofBeta-defensinGeneExpressioninOralMucosaofNormalRatsInducedbyBaicalinAbstractObjective：Toinvestigatewhetherthe

5、reisstatisticalcorrelationbetweengeneexpressionchangeof[3-defensininnormalratoralmucosaanddoseandtimeofadministrationofbaicalinthroughobservationofwhetherthereisconstitutiveexpressionof13-defensingeneinnormalratoralmucosaandofinfluenceofadministrationwithbaicalinongen

6、eexpressionchangeof13一defensininnormalratoralmucosa，thustoprovideanexperimentalbasisfor13-defensingeneexpressioninducedbytraditionalChinesemedicine．Methods：Randomlydivide188normalWistarratsintoseveralgroups：GroupI(ConstitutiveExpressionGroup)：Include20normalrats：colle

7、ctsamplesofgingiva，buccalmucosa，salivaandgingivalcrevicularfluidfromeachrat；carryoutsemi—quantitativedetectionofthegeneexpressionlevelofrat13-defensin-2bymeansofreversetranscriptas-polymerasechainreaction；usetheintegratedopticaldensityratiobetweenrBD一2and13-actintoexp

8、ressthegeneexpressionlevelofrat13-defensin．2．GroupII(InducibleExpressionGroup)：Include168normalratswhichwererandomlydividedi