黄芩苷对实验性肺纤维化大鼠肺内ctgf表达影响

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1、中文摘要黄芩苷对实验性肺纤维化大鼠肺内CTGF表达的影响摘要目的：肺纤维化(pulmonaryfibrosis，PF)是以肺泡间质炎症细胞浸润、纤维细胞增生和细胞外基质进行性沉积为主要特征的慢性间质性肺疾病。其发病机制还不十分清楚，目前尚无理想的治疗方法。气管内一次性滴注博莱霉素(bleomycin，BLM)复制肺纤维化模型己得到国内外公认。结缔组织生长因子(connectivetissuegrowthfactor，CTGF)作为许多促纤维化刺激的共同下游介导因子，在介导肺纤维化的发生中发挥十分重要的作用。己知在BLM诱导的肺纤维化肺内CTG

2、F蛋白表达增多。黄芩苷(Baicalin，Ba)为一具有．酚羟基结构的黄酮类衍生物。．本课题组以往研究发现连续腹腔注射黄芩苷(12．5mg／kg／d，×28d)，能有效地减轻BLM诱导的肺纤维化，但是其作用机制尚未明了。黄芩苷能否影响CTGF的表达迄今国内外尚未见报道。本实验观察不同剂量的黄芩苷对BLM诱导的大鼠肺纤维化及肺内CTGF蛋白上调的影响，以阐明黄芩苷防治肺纤维化的机制，为此药的临床应用提供实验资料。方法：将45只SD(古)(体重170．1809)大鼠随机分成六组：即①NS+NS组(n_6)：气管内一次性滴注生理盐水(O．5ml／k

3、g)后，每天腹腔注射NS(1ml／kg)，连续28天；QNS+Bal2．5mg组(n--6)：气管内一次性滴注NS(O．5ml／kg)后，每天腹腔注射黄芩苷12．5mg／kg，连续28中文摘要天；(重)BLM+NS组(n=8)：气管内一次性滴注BLM(5mg／kg)后，每天腹腔注射NS(1ml／kg)，连续28天；@BLM+Ba6mg组(n=9)：气管内一次性滴注BLM(5mg／kg)后，每天腹腔注射黄芩苷6mg／kg，连续28天；(昼)BLM+Bal2．5mg组(n_9)：气管内一次性滴注BLM(5mg／kg)后，每天腹腔注射黄芩苷12．5

4、mg／kg，连续28天；⑥BLM+Ba50mg组(n=7)：气管内一次性滴注BLM(5mg／kg)后，每天腹腔注射黄芩苷50mg／kg，连续28天。以上各组在气管内给药后第29天取材。大鼠在10％水合氯醛(3ml／kg)腹腔注射麻醉后，放血处死。将左肺置于新鲜配制的4％多聚甲醛溶液中固定，固定后经石蜡包埋、切片，用于CTGF免疫组织化学染色。其余肺组织去气管后制成肺粉用于羟脯氨酸(hydroxyproline，HYP)含量测定。用肺组织HYP含量测定法来检测大鼠的肺纤维化程度；用免疫组化方法观察CTGF在肺组织中的表达。数据用均数±标准差(；

5、±SD)表示，采用SPSS一13．0统计软件，多个样本均数比较用单因素方差分析(One．WayANOV：A)，多个样本均数间的两两比较用最小显著差法(1eastsignificantdifferrence．LSD)，以P<0．05作为判断差异显著性的标准。结果：1．观察期间大鼠的一般情况：NS+NS组、NS+Ba12．5mg组大鼠表现活泼，反应灵敏，皮毛光滑。BLM+NS组大鼠精神差，活动减少，反应迟钝，毛发晦暗竖立，食欲差，发育迟缓，体重低。BLM+Ba6mg组、BLM+Bal2．5mg组及BLM+Ba50mg组大鼠精神、食欲、毛色、体重及

6、活动中文摘要情况较BLM+NS组均有所好转。2．大鼠肺组织HYP含量：NS+NS组、BLM+NS组肺组织HYP含量分别为(6．95±O．81)lag／raglungweight和(13．40-t-1．50)lag／mglungweight。与NS+NS组比较，BLM+NS组肺组织HYP含量显著增高(P<0．01)。BLM+Ba6mg组、BLM+Bal2．5mg组、BLM+Ba50mg组肺组织HYP含量分别为(9．54--+1．81)lag／mglungweight、(8．87±1．31)lag／raglungweight和(11．05-+1．

7、08)lag／mglungweight。与BLM+NS组比较，三个治疗组(BLM+Ba6mg组、BLM+Bal2．5mg组、BLM+Ba50mg组)肺组织HYP含量均明显降低(均P<0．01／)，但三个治疗组肺组织HYP含量仍高于NS+NS组(均PO．05)。3．肺

8、组织切片CTGF免疫组化结果：NS+NS组仅在支气管上皮细胞有少量的CTGF免疫阳性表达，CTGF阳性区域积分光密度为2．23±O．39。BLM+NS组CTGF阳性