牛源金黄色葡萄球菌药物敏感性试验和分型研究

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1、DrugSusceptibilityTestandGeneticSubtypesamongStaphylococcusAureusDetectedfromBovineT‘。submittedt013eslssU上qCngdaoAgriculturalUniversityInFulfillmentoftheRequirementfortheDegreeofMasterofAgronomyShiHong(CollegeofAnimalScienceandVeterinaryMedicine)Supervisor：ZhengZengren

2、WangShubaiShanHuQingdao．ChinaJune，2012学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。如不实，本人负全部责任。学位论文作者签名．史讧签字日期：纠脾石月彳日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，

3、允许论文被查阅和借阅。本人授权学校可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文作者签名：史让导师签字：彩饭厶签字日期：纠p年6月)1日签字日期：驯L年6月≥7日牛源金黄色葡萄球菌药物敏感性试验和分型研究摘要奶牛乳房炎是影响世界奶牛养殖业经济效益的主要疾病之一，而金黄色葡萄球菌是奶牛乳房炎的主要病原茵。因此，本研究对中国动物卫生与流行病学中心2009年-2011年分离自生牛奶的102株金黄色葡萄球菌进行了13种抗茵药物的耐药性

4、的检测，并进行了分子流行病学调查和肠毒素检测。旨在探讨其对抗茵药物的耐药性及致病基因类型，为生产上有效防治奶牛乳房炎提供理论依据．本研究采用肉汤微量稀释法，对102株牛源金黄色葡萄球菌进行了7类13种抗茵药物的药敏试验．结果显示：102株牛源金黄色葡萄球菌对青霉素、磺胺异恶唑、氨苄西林和红霉素的耐药最为严重，耐药率分别为97．06％、96．08％、82．35％和80．39％，对其他抗菌药的耐药率相对较低，对万古霉素无耐药·li；其中仅l株茵株只耐1种药物，其它菌株均具有多重耐药性，多数耐受“种药物。可见，牛源金黄色葡萄球菌的耐药性已

5、非常严重，且以多重耐药为主。对不同时间分离茵株的耐药性状况进行比较表明，耐药性有逐年加重的趋势。复方新诺明、头孢噻呋和头孢西丁均为比较敏感的药物，可优先用于奶牛乳房炎的临床治疗。本研究周SPA基因多态性分型方法对102株金黄色葡萄球茵进行分子流行病学调查。结果显示102株牛源金黄色葡萄球菌全部通过SPA分型，分型率为100％，共分为26个型，t518型最多有21株；t521型有14株；t114型有12株；新型2型有9株；t091型和t519型各有8株；t002型有6株；t2756型和t1751型各有3株；新型1型有2株；toll型、

6、t2467型、t127型、t189型、t954型、“37型、t034型、t796型、t9873型、t7295型、t9010型、t1376型、t078型、t3104型、t267型和新型3型各有1株，其中新型1型、新型2型和新型3型为新发现的基因型，已经提交数据库进行审核。从分型结果来看，这26个型当中以产物大小约300bp左右的1518型最多且分布最广泛，可能为主要的流行株。用PCR方法对肠毒素基因SEA、SEB、SEC、SED、SEE、SEG、SHH、SEI和SEJ进行分型，结果显示102株金黄色葡萄球菌中，检测到肠毒素基因的有91

7、株，占89．22％，同时携带2种及以上毒素基因的菌株有50株，占49．02％，带有SEI肠毒素基因的菌株最多，77株，占75．49％。携带传统肠毒素基因SEA、SEB、SEC、SED和SEE的菌株总共有30株，占29．41％。携带新型肠毒素SEG．SEJ的菌株较多共有86株，占84．31％。表明SEI型肠毒素可能与金黄色葡萄球在奶牛乳房炎中的致病性密切相关。关键词：牛源金黄色葡萄球菌；耐药性；SPA分型；肠毒素检测囊壹岛盔些太堂亟±堂僮论塞△坠蚴DrugSusceptibilityTestandGeneticSubtypesamon

8、gStaphylocoCcusAureusDetectedfromBovineAbstractsThemastiffsofaairyCOWisoneofthemostcommondiseasesthatcause删economiclo