大鼠肺癌发生过程中microrna34a、p53和mdm2表达及意义

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1、新乡医学院硕士学位论文大鼠肺癌发生过程中microRNA34a、p53和MDM2表达及意义姓名：王坦申请学位级别：硕士专业：病理学与病理生理学指导教师：杨廷桐201204新乡医学院研究生论文大鼠肺癌发生过程中microRNA34a、p53和MDM2表达及意义摘要目的检测mi‘湘I斟A34a、p53和MDM2在大鼠肺癌发生发展过程中的表达，探讨microRNA34a、p53和MDM2与肺癌发生之间的关系。方法大鼠肺癌模型建立：wistar大鼠68只，其中60只在左下肺叶支气管灌注含有MCA和DEN的碘油溶液0．1m1，另8只灌注0．1m1碘油作为对照。不同时期进行处死大鼠，制作成石蜡包

2、埋组织块，切片HE染色，镜检并进行诊断分型，采用荧光实时定量PCR方法进行检测microINA34a的表达情况。用免疫组织化学法检测p53和MDM2的表达情况，利用原位杂交的方法检测p53和MDM2的mI玳A情况，并进行分级，用统计软件SPSSl7．0进行卡方检验和相关性统计统计分析。争士申耋口7R1．动物模型实验组有48只大鼠发生癌变，诱癌率为80％(48／60)，癌变的大鼠标本有多个阶段病变共存，共获取支气管黏膜上皮增生21例，不典型增生13例，原位癌28例，侵袭癌20例，转移癌16例。对照组未见肿瘤发生。2．microI斟A34a的表达采用荧光实时定量PCR方法检测microR

3、AN34a，正常组microI玳A34a表达为0．825士O．093；癌旁组织组O．172士0．040；原位癌组织0．037士0．．034；浸润癌O．019士0．005；转移癌0．003士0．004。实验组与对照组之间存在差异(p<0．01)，实验组内存在组内差异(p

4、达：对照组0．79士0．48；癌旁组织组1．92士1．04；癌组织组2．57士1．09；浸润癌组2．98士1．48；转移癌组3．48士1．98，组间方差分析F=21．726，p<0．05，对照组与原位癌组、癌旁组织组、浸润癌组和转移癌组差异有显著性p<0．01)。基因和蛋白的表达具有一致性(鼠仰口=O．582，p=0．000)4．MDM2基因与其蛋白表达根据半定量评分标准MDM2基因表达评分为对照组新乡医学院研究生论文1．13士1．10；癌旁组织组1．90士1．03；原位癌组织组3．61士0．73；浸润癌组4．41士1．04；转移癌组5．30士0．54。组问方差分析，=30．670，

5、p

6、RNA二者呈负相关(凫口瑙D，z0，．=一O．690，p=O．ooO)；microRNA34a和p53蛋白二者呈负相关(R口坶D，z0r=一O．634，p=0．000)；MDM2蛋白和p53蛋白二者呈正相关(R以坶D，z台r=0．609，p=O．ooO)；MDM2mRNA和p53mRNA二者呈正相关(尸台口昭D咒0r=0．620，p=0．000)。结论1．在肺癌中microRNA34a呈低表达甚至缺失，p53和MDM2呈高表达。micr0RNA34a与p53和MDM2之间呈负相关，三者与肺癌发生发展具有密切的关系。2．microI必A34a和p53、MDM2三者之间具有一定的内在联系

7、，联合检测有利于肺癌的早期诊断。关键词大鼠；肺癌；microRNA34a；P53；MDM2；RT-PcR／o．2．TheExpressionandSignificanceofmicroRNA34a，p53and：MDM2inDeVelopmentProcessofLungCancerinRatsAbstractobje嘶Ve111edetectiontheeXpress胁ofmicroRNA34a，p53andMDM2int11edevelopmentpr