不同剂量甲泼尼龙对大鼠急性肺损伤治疗效果及肺泡巨噬细胞在其中的作用

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1、徐州医学院硕士学位论文不同剂量甲泼尼龙对大鼠急性肺损伤治疗效果及肺泡巨噬细胞在其中的作用姓名：刘大鹏申请学位级别：硕士专业：麻醉学指导教师：庞庆丰2012-04徐州医学院硕士学位论文不同剂量甲泼尼龙对大鼠急性肺损伤治疗效果及肺泡巨噬细胞在其中的作用中文摘要目的观察不同剂量甲泼尼龙(methylprednisolone，MPL)对大鼠急性肺损伤(acutelunginjury，ALl)治疗效果的差异，并探讨不同剂量MPL对肺泡巨噬细胞(alveolarmacrophages，AM)影响的不同在其中的作用。方法90只雄性成年清洁级大鼠随机分为5组(n=18)：对照组(Ns组)、损伤组(LPS

2、组)、小剂量治疗组(LPS+MPL3mg组)、中剂量治疗组(LPS+MPL30mg组)、大剂量治疗组(LPS+MPLl80mg组)。尾静脉注射脂多糖(1ipopolysaccharides，LPS)5mg／k酬(连续三天)制作急性肺损伤模型。首次尾静脉注射LPSlh后，三个治疗组分别连续腹腔注射MPL3mg／kg／d(LPS+MPL3mg组)、30mg／kg／d(LPS+MPL30mg组)或180mg／kg／d(LPS+MPLl80mg组)；三天后，每天同一时间各治疗组腹腔注射相应剂量MPL。LPS组尾静脉注射LPSlh后，连续腹腔注射生理盐水(normalsaline，NS)2ml／k

3、g／d，三天后，每天同一时间相应剂量NS。对照组：尾静脉、腹腔分别注射相应容量的NS。于制模后12h、7d和14d各组随机处死6只大鼠并取材。实验期间每日观察动物称取体重，在规定时问处死动物后，结扎右侧主支气管，行左侧支气管肺泡灌洗，收集肺泡灌洗液(bronchoalveolarlavagefluid，BALF)，取4陬l灌洗液，2毗l用于计数BALF中细胞总数，2陬l进行Wright-Giemsa染色观察AM比例；余下BALF离心后取上清采用酶联免疫吸附法(EHSA)检钡t]III型前胶原(procollagentypeIII，PCIII)含量；细胞沉淀进行AM提取，用吖啶橙／溴化乙锭

4、双荧光染色法检测AM凋亡情况、髓过氧化物酶染色法检测AM对凋亡中性粒细胞的吞噬活性。右肺中叶称湿、干重，用于计算肺湿／干重比；下叶通过HE染任．，观察肺组织病理学改变。徐州医学院硕士学位论文结果(1)腹腔注射3mg和30mgMPL能有效抑制ALl大鼠体重下降趋势并于造模9d后明显高于LPS组(P<0．05)，而这两组之问无有统计学意义的差异(P>0．05)；与以上两组相比腹腔注射180mgMPL使ALI大鼠体重下降更明显(P<0．05)，在造模8d后明显低于其他各治疗组及LPS组(P<0．05)，并呈不断下降趋势。(2)与LPS组相比，腹腔注射3mg和30mgMPL能有效减轻ALI大鼠右

5、肺中叶湿／干重比(P<0．05)，到造模后14d时与NS组已无有统计学意义的差异(尸>0．05)，且这两组之间在造模7d、14d时无有统计学意义的差异(P>O．05)；腹腔注射180mgMPL使肺湿／干重比在造模7d、14d时持续升高，并高于其他两个治疗组(P<0．05)，到造模后14d后时已明显高于LPS组。(3)与LPS组相比，腹腔注射3mg和30mgMPL能有效减轻ALI大鼠右肺下叶病理学评分，到造模后14d时与NS组己无有统计学意义的差异(P>0．05)，且这两组之间也无有统计学意义的差异(尸>O．05)；腹腔注射180mgMPL却使ALI大鼠右肺下叶病理学评分在造模7d、14d

6、时持续升高并高于其他两个治疗组(P<0．05)，到造模后14d时已明显高于LPS组。(4)与LPS组相比，腹腔注射3mg和30mgMPL能有效减少AU大鼠BALF中PCIII的含量，到造模后14d时与NS组已无有统计学意义的差异(P>0．05)，且这两组之间没有有统计学意义的差异(P>0．05)；腹腔注射180mgMPL使ALI大鼠BALF中PCIII的含量在造模7d、14d时持续升高并高于其他两个治疗组(P<0．05)，到造模后14d时已明显高于LPS组。(5)与LPS组相比，腹腔注射3mg和30mgMPL能有效减少AU大鼠BALF中的细胞总数，到造模后14d时与NS组己无有统计学意义

7、的差异(P>0．05)，且这两组之间在造模7d、14d时无有统计学意义的差异(P>O．05)；腹腔注射MPLl80mg使ALI大鼠7d、14d时持续升高并高于其他两个治疗组(尸<0．05)，到造模后14d时已明显高于LPS组。(6)与LPS组相比，腹腔注射3mg和30mgMPL,的ALl大鼠BALF中的AM比例在12h明显下降(尸<0．05)，但在造模7d及14d时逐渐回升，其中LPS+MPL3mg组到造模后14d时明显高于其他两个