氟对培养大鼠大脑皮层星形胶质细胞的毒性研究

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1、氟对培养大鼠大脑皮层星形胶质细胞的毒性研究2007届硕士研究生毕业论文英文缩略词检表英文全称FluorideSodiUSfluoddeAstrocytcGlialfibrillryacidicproteinSuccinatedehydrogenase5’-nucleophosphataseTartrate-resistantacidphosphataseDlllbe啪modifiedeaglemediumN-2-hydroxyethypiperazine-N’-2．ethanesulfonicacidFetalbovine翻姗mDimethylsulphoxideFlowcytomeler

2、0pticmdensityPropidiumiodideEthidiumbromide中文全称氟氟化钠星形胶质细胞胶原纤维酸性蛋白琥珀酸脱氢酶5'-核苷酸酶酸性磷酸酶Dulbec釉改进的Fae,le培养基N-2．羟乙基派嚷_N’．2一乙磺酸胎牛血清二甲基亚砜流式细胞仪光密度碘化丙啶溴化乙啶Methylthiazolyltetrazolium甲基噻唑基四唑Centralna'VOll．qsystem2抗生物素链霉亲和素一生物素复合物中枢神经系统缩PoT猁l盆一F№船一跏～御一一l罾咖蹦∞雌盼舯一氟对培养大鼠大脑皮层星形胶质细胞的毒性研究2∞7届硕士研究生毕业论文摘要目的通过探讨不同剂量NaF

3、诱导体外培养大鼠星形胶质细胞凋亡、细胞周期和5，-NT、SDH、ACP活性变化机制，为进一步研究氟的中枢毒性机制提供实验依据。方法(1)通过体外分离纯化培养星形胶质细胞的方法，获得纯度达98％以上的星形胶质细胞(特异性抗GFAP免疫化学鉴定)；(2)MTr法检测各代细胞对NaF毒性的敏感性；(3)显微镜观察法、MTT法、FCM确定NaF染毒剂量范围；(4)采用倒置显微镜观察和FCM检测的方法，观察不同时间点(12h、24h、48h、72h)不同浓度NaF诱导的细胞凋亡，FCM检测细胞周期构成比；(5)紫外分光光度计检测SDH、5’-NT、ACP活性。结果(1)星形胶质细胞传代数超过8代后对

4、毒物的敏感性明显下降，故宜采用笫8代以内细胞作NaF毒理学研究；(2)NaF抑制星形胶质细胞生长和诱导细胞凋亡，影响细胞周期构成比呈时效口

5、时间延长，subGI细胞逐渐增多(时效P<0．01；量效P0．1)；5'-NT、SDH、氟对培养大鼠大脑皮层星形胶质细胞的毒性研究2007届硕士研究生毕业论文ACP活性与subOlDNA相

6、对含量呈显著负相关(SDH：r=-0．84148P<0．02；ACP：r=-0．90416P<0．01)·结论(I)采用大鼠大脑皮质星形胶质细胞探讨NaF的毒性机制，宣选择传第8代以内细胞；本实验首次以体外培养大鼠大脑皮质星形胶质细胞为研究模型，观察NaY对星形胶质细胞的毒性作用；(2)NaF诱导星形胶质细胞凋亡的效应与剂量和时间有关；(3)NaF可以抑制星形胶质细胞SDH、ACP活性，对5’-NT活性影响不明显；(4)星形胶质细胞SDH、ACP活性与subOIDNA相对含量显著负相关；(5)NaF通过诱导星形胶质细胞从G2厅d期阻滞向s期阻滞转变启动凋亡．关键词氟，星形胶质细胞，细胞凋亡

7、，细胞周期，酶活性4氟对培养大鼠大脑皮层星形胶质细胞的毒性研究2007届硕士研究生毕业论文StudyoftoxiceffectsoffluorideOilratcerebralcortexastrocytesinvitroAbstractobjectiveTostudyapoptosis，thechangsofcellcycleandenzymaticactivityof5’．NT，SDH，ACPonastrocytes