染料木黄酮后处理对人胃黏膜上皮细胞缺氧复氧损伤的保护作用及其机制研究

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1、徐州医学院硕士学位论文染料木黄酮后处理对人胃黏膜上皮细胞缺氧/复氧损伤的保护作用及其机制研究姓名：李豫申请学位级别：硕士专业：神经生物学指导教师：张建福20090401徐州医学院硕士学位论文缩略词表Abbreviation缩略词英文全称中文全称Genigenistein染料木黄酮GES-1humangastricepithelialcelllines人胃黏膜上皮细胞系GI-R损伤gastricschemia-reperfusioninjury胃缺血-再灌注损伤H/R损伤hypoxia/reoxygenationinjury缺氧/复氧损伤MODSmultipleo

2、rgandysfunctionsyndrome多器官障碍综合征KRKrebs-RingerbicarbonatesolutionKrebs碳酸氢盐缓冲液CGRPcalcitoningenerelatedpeptide降钙素基因相关肽VR1Vanilloidreceptorsubtype1辣椒素受体亚型1NBTnitrobluetetrazoliumchloride氮兰四唑BCIP5-bromo-4-chloro-3-indolylphosphate5-溴-4-氯-3吲哚磷酸BSAbovineserumalbumin牛血清蛋白O.D.opticaldensity光

3、密度DMSOdimethylsulfoxide二甲基亚砜PIpropidiumiodide碘化丙啶SDS-PAGEsodiumdodecylsulfate十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳1徐州医学院硕士学位论文论文独创性声明本论文《染料木黄酮后处理对人胃黏膜上皮细胞缺氧/复氧损伤的保护作用及其机制研究》是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。论文中除了特别加以标注和致谢的地方外，不包含其他人或机构已经发表或撰写过的研究成果。其他同志对本研究的启发和所做的贡献均已在论文中作了明确的声明并表示了谢意。作者签名：日期：200年月论文使用授权声明本人完全了

4、解徐州医学院有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留送交论文的复印件和电子文档，允许论文被查阅和借阅；学校可以公布论文的全部或部分内容，可以采用影印、缩印或其它复制手段保存论文。保密的论文在解密后遵守此规定。作者签名：导师签名：日期：200年月45徐州医学院硕士学位论文论文审阅认定书研究生李豫在规定的学习年限内，按照研究生培养方案的要求，完成了研究生课程的学习，成绩合格；在我的指导下完成本学位论文，经审阅，论文中的观点、数据、表述和结构为我所认同，论文撰写格式符合学校的相关规定，同意将本论文作为学位申请论文送专家评审。导师签名：日期：200年月46徐州医学

5、院硕士学位论文染料木黄酮后处理对人胃黏膜上皮细胞缺氧/复氧损伤的保护作用及其机制研究中文摘要目的研究染料木黄酮后处理对人胃黏膜上皮细胞缺氧/复氧损伤的保护作用并初步探讨其机制。方法体外培养人胃黏膜上皮细胞系（GES-1），建立缺氧/复氧损伤模型。实验时细胞随机分为五组：常氧对照组（N）、缺氧/复氧组（H/R）、染料木黄酮genistein后处理组（GP）、辣椒素受体拮抗剂capsazepine+染料木黄酮后处理组（C+GP）、DMSO溶剂对照组（DM）。采用MTT法检测细胞活力，流式细胞仪检测细胞凋亡百分率，Hoechst33258荧光染色观察凋亡细胞核的形态学

6、变化，可见光分光光度法测定胞浆总超氧化物歧化酶（T-SOD）和丙二醛（MDA）水平，免疫印迹法测定胞浆CGRP、Bcl-2、Bax的表达，免疫细胞化学法检测CGRP的表达。结果MTT检测显示，各组细胞存活率分别为100.0%±0%、51.4%±4.1%、66.7%±2.0%、56.1%±2.8%和50.7%±2.4%。染料木黄酮后处理可以保护缺氧/复氧时的细胞，GP与H/R比较，细胞存活率明显升高，差异具有统计学意义（P<0.01）。辣椒素受体拮抗剂能够翻转染料木黄酮后处理的保护效应，C+GP与GP比较，细胞存活率降低，差异具有统计学意义（P<0.01）。流式细

7、胞仪分析显示，各组细胞凋亡率分别为2.28%±0.44%、12.17%±2.15%、5.40%±1.22%、10.43%±1.37%和11.02%±2.19%。GP与H/R比较，细胞凋亡率明显降低，差异具有统计学意义（P<0.01）。C+GP与GP比较，细胞凋亡率升高，差异具有统计学意义（P<0.01）。Hoechst33258荧光染色显示，H/R凋亡阳性细胞增多，GP凋亡细胞减少，C+GP凋亡细胞增多。可见光分光光度法检测显示，各组细胞T-SOD水平分别为32.43%±2.79%,22.38%±1.63%,28.76%±1.58%,23.65%±1.07%和2

8、2.18%±1.72%。