抗菌肽selysin的表达及其对肝癌细胞hepg2的毒性作用

《抗菌肽selysin的表达及其对肝癌细胞hepg2的毒性作用》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、华中科技大学硕士学位论文抗菌肽Selysin的表达及其对肝癌细胞HepG2的毒性作用姓名：舒慕娅申请学位级别：硕士专业：生物物理学指导教师：陈正望20090519华中科技大学硕士学位论文摘要尽管在征服癌症的道路上，我们已经取得了卓越的成就。但是对癌症的治疗仍然存在许多障碍，例如发现很多癌细胞对药物产生了抗性，所以开发新的抗癌药物有着巨大的治疗意义和经济价值。家蝇（Muscadomestica），属于昆虫纲双翅目环裂亚目的家蝇科，是我国大部分地区最常见和数目最多的一种，它的体内存在大量的抗菌肽。研究发现这些抗菌肽不但能抗菌，而且有的还能起到抗癌作用。了解这些抗菌肽的抗

2、癌作用机理，对我们开发新的抗癌药物有着重要意义。本论文以融合表达的一种新的抗菌肽Selysin为研究对象，探索其抗癌功能。实验发现它对于癌细胞的增殖有一定的抑制功能。因此，我们研究它在抗癌细胞过程中的作用，并希望能更深入了解抗菌肽Selysin的抗癌机理。为了获得大量的Selysin重组肽，根据毕赤酵母对蛋白编码的偏好性，我们构建了融合表达载体，并将其转入到毕赤酵母表达菌株中，表达出抗菌肽Selysin。这为以后大量得到抗菌肽Selysin提供了便利，同时也有助于我们进一步研究抗菌肽Selysin抗癌及抗菌的作用机理。在实验中，我们发现当用3H-TdR掺入法检测抗菌

3、肽Selysin对肝癌细胞HepG2作用时，Selysin能够对HepG2的增殖有抑制作用。抗菌肽Selysin在高浓度条件下能明显抑制HepG2细胞对3H-TdR摄取量而在低浓度下没有这种现象。还发现抗菌肽Selysin在高浓度能通过破膜作用使得HepG2细胞死亡。同时，用不同浓度的抗菌肽Selysin处理HepG2时，又发现在低浓度处理条件下Selysin能激活caspase-3，而caspase3是在细胞凋亡中的重要标志性分子。推测抗菌肽Selysin在特定的浓度下可以通过Caspase信号途径来激活细胞凋亡从而产生抗癌作用。我们的研究结果预示抗菌肽Selys

4、in在未来对癌症治疗的应用上会有广阔的前景。关键词：家蝇；抗菌肽；Selysin；HepG2；细胞凋亡I华中科技大学硕士学位论文ABSTRACTInspiteofgreatadvanceincancertherapy,thereisconsiderablecurrentinterestindevelopinganticanceragentswithanewmodeofactionbecauseofthedevelopmentofresistancebycancercellstowardscurrentanticancerdrugs.Muscadomestica,be

5、longingtoinsecta,diptera,cyclorrhapha,muscidae,widelyspreadinginChina,isthebiggestnumbermuscaeinourcountry.Averylargenumberofantimicrobialpeptides(AMPs),whicharetoxictobacteriaaswellascancercells,hasbeenisolatedfromMuscadomestica.Sounderstandingthemolecularmechanismsincytotoxicactivity

6、againstcancercellsofAMPsareimportantforexplorenewcancertherapeutics.Inthisissue,westudiedthefunctionalcharacterizationofrecombinatAMPs,Selysin,initiallyextractedfromMuscadomestica,andfoundthatitcaninhibittheproliferationofcancercells.SoweanalyzeditsfunctionsincytotoxicactivitytoHepG2,a

7、kindoflivercancercellline,inordertounveilitsconcealedmolecularmechanisms.ToprocurelargescaleofSelysinpreparation,recombinantSelysinwasexpressedinPichiapastoris.WecouldobtainlargescaleSelysinpreparationandcontinuefurtherinvestigationofthispromisingtherapeuticpeptide.Duringourexperimen